大气压低温等离子体对鼻咽癌生物学行为影响的研究

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目的:大气压低温等离子体(cold atmosphere plasma,CAP)是由正负带电粒子和各种中性粒子组成的的一种近似电中性的电离气体,在某些恶性肿瘤中可通过多种机制参与抗肿瘤的过程。鼻咽癌是一种发病隐秘、预后较差的常见头颈部恶性肿瘤。本研究旨在观察CAP处理对鼻咽癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响,以期能够找到对于改善鼻咽癌预后更有效的新型技术和治疗手段。方法:应用CAP分别处理鼻咽癌CNE002细胞0s、15s、30s、60s,倒置显微镜下观察不同时长CAP处理后细胞形态变化情况;应用CCK-8法检测细胞增殖能力;划痕实验及Transwell法检测细胞迁移能力;流式细胞术及Western blot法测定细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白的表达;向细胞内装载DCFH-DA探针后,荧光显微镜下观察细胞内活性氧含量的变化。数据采用单因素方差分析方法,利用SPSS22.0统计分析软件进行统计学分析。结果:1、倒置显微镜下观察发现,CAP处理使细胞体积变小,形态变圆,当处理时长达到60s时,部分贴壁细胞与基底附着能力降低,呈团状漂浮。2、CCK-8结果显示,CAP处理使细胞增殖能力受到显著抑制(P<0.001),并且这种抑制作用与处理时长相关。3、划痕实验与Transwell实验结果显示,CAP处理后显著抑制细胞迁移能力(P<0.05),这种抑制作用亦与处理时长相关。4、流式细胞术及Western blot法检测结果显示,CAP可促进细胞凋亡(P<0.05),当处理剂量为30s、60s时促凋亡蛋白Bax表达显著上调(P<0.05)。5、荧光显微镜检测结果示,随着处理时长的增加,细胞内ROS含量呈上升趋势,提示CAP可增加细胞内ROS含量。结论:大气压低温等离子体具有抑制鼻咽癌增殖、迁移及促进其凋亡的能力,并且可使鼻咽癌细胞内活性氧含量升高。
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