【摘 要】
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火参果（Cucumis metuliferus）,为葫芦科甜瓜属一年生的蔓性草本植物。其中,果皮是食用火参果后的主要副产物,约占全果重量的四分之一。有研究表明植物果皮中的果胶多糖有降血糖、降血脂、吸附重金属和预防癌症等作用,但目前未见关于火参果果皮活性的研究。因此,本论文拟对火参果果皮中的果胶多糖进行分离纯化,并对其结构和活性进行研究,以期为火参果资源的充分利用、活性物质的开发提供科学依据。主要研
【基金项目】
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广东省重点领域研发计划（2019B020211002）； 国家重点研发项目（2016YFE0106000）； 广州市科技计划项目（201804020077）； 广东省高校珠江学者资助计划支持项目（2017）； 硕士生短期访学项目（2019GWFX006）；
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火参果（Cucumis metuliferus）,为葫芦科甜瓜属一年生的蔓性草本植物。其中,果皮是食用火参果后的主要副产物,约占全果重量的四分之一。有研究表明植物果皮中的果胶多糖有降血糖、降血脂、吸附重金属和预防癌症等作用,但目前未见关于火参果果皮活性的研究。因此,本论文拟对火参果果皮中的果胶多糖进行分离纯化,并对其结构和活性进行研究,以期为火参果资源的充分利用、活性物质的开发提供科学依据。主要研究结果如下:（1）火参果果皮粗多糖的提取和成分分析结合热水提取、乙醇沉淀等方法制得火参果果皮粗多糖（CMPP）。紫外吸收光谱分析可知CMPP不含蛋白质、核酸、多酚、黄酮等杂质。间羟基联苯法结果表明CMPP中的半乳糖醛酸含量为45.01±4.21%。离子色谱测定单糖组成的结果表明,CMPP主要由半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖等多种单糖成分组成,其中半乳糖醛酸含量最高。（2）火参果果皮多糖的分离纯化及结构表征通过DEAE-52离子交换色谱柱和G-100凝胶色谱柱从CMPP中分离纯化得到的两个主要多糖（CMPP-1和CMPP-2）。凝胶渗透色谱结果表明CMPP-1和CMPP-2的分子量分别为7.35 k Da和6.90 k Da。扫描电镜结果显示,CMPP-1外观平滑、结构致密,而CMPP-2结构呈孔洞状。结合红外光谱、甲基化和核磁共振等方法对结构进行分析,可知CMPP-1和CMPP-2均含有果胶多糖的典型官能团,具有α和β糖苷键构型,糖残基主要是来自Gal A、Rha、Gal和Ara的离子片段,多为4-Gal（p）A、2-Rha（p）、t-Gal（p）A等糖苷键,主链具有HG和RG结构域,侧链以半乳糖醛酸和阿拉伯糖组成,主要以→2)-α-L-Rha（p）-(1→键进行各片段连接,符合RG-I结构域特征。特别地,与CMPP-2相比,CMPP-1具有更长的侧链分支。（3）火参果果皮多糖的免疫活性研究体外细胞实验表明,CMPP、CMPP-1和CMPP-2在0.78-100μg/m L浓度范围内对小鼠巨噬细胞RAW264.7无细胞毒性,且CMPP（0.78-50μg/m L）、CMPP-1（0.78-50μg/m L）和CMPP-2（6.25-50μg/m L）能显著提高（p＜0.05）RAW264.7对NO、TNF-α和IL-6的分泌量,并呈剂量依赖性,表明其具有良好的免疫活性。进一步利用连续动态胃肠道模拟系统（SIMGI）模拟CMPP的消化反应,发现CMPP（3.5 g/L）能促进上结肠、横结肠、降结肠部位的Archea、Roseburia、Akkermansia、Prevotella、Bacteroides等肠道菌群的增殖,同时可以提高乙酸、丙酸和丁酸的含量,减少铵的含量,表明CMPP具有免疫调节活性。
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