HIV/AIDS患者滤泡辅助性T细胞及其关键转录因子在外周血中的变化及与病程发展的关系

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目的1.分析HIV/AIDS患者外周血中Th1、Th2和Tfh细胞以及它们相应的转录因子T-bet m RNA、GATA3 m RNA、Bcl-6 m RNA的变化。2.通过分析Tfh细胞与CD4+T细胞的相关性,初步探讨Tfh细胞与HIV/AIDS疾病进展的关系。方法筛选2014年4月至11月期间河南中医学院第一附属医院艾滋病研究中心经HIV抗体确证实验阳性者61例,根据CD4+T细胞数将HIV/AIDS患者分为A(CD4≤200 cell/μl)、B(200<CD4<500 cell/μl)、C(CD4≥500 cell/μl)三组,同期选取20例来自体检中心的健康人作为健康对照组,采用流式细胞术(FCM)检测淋巴细胞亚群(CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3-CD16+CD56+细胞、CD3-CD19+细胞),Th1(CD4+IFN-γ+),Th2(CD4+IL4+)和Tfh细胞(CD4+CXCR5+ICOS+)的百分比。RT-PCR技术检测其外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子T-bet m RNA、GATA3 m RNA和Bcl-6 m RNA的相对表达量。分析Tfh细胞与Bcl-6 m RNA和B细胞之间的相关性,Tfh细胞与CD4+T细胞的相关性。结果1.淋巴细胞亚群分析:HIV/AIDS各组患者CD3+CD4+T细胞百分比明显低于健康对照组(P<0.05)。CD3+CD8+T细胞比健康对照组高(P<0.05)。四组CD3+T细胞、B(CD3-CD19+)细胞和NK(CD3-CD16+CD56+)细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.Th1/Th2/Tfh细胞及其相应转录因子分析:A组(CD4<200)患者Th1占CD4+T细胞百分比(13.56±8.47)明显高于其它三组(P<0.05),其余三组Th1比较无统计学差异(P>0.05)。Th1细胞的转录因子T-bet m RNA相对表达量A组(11.06±4.87),B组(10.21±3.83),C组(7.86±3.95)均高于健康对照组(P<0.05);Th2细胞在四组间比较差异无统计学意义(P>0.05),其转录因子GATA3 m RNA相对表达量A组(1.95±0.45),B组(2.49±0.91),C组(2.64±0.93)均高于健康对照组(P<0.05);A组Tfh细胞(CD4+CXCR5+ICOS+)百分比(5.27±2.34)高于C组(1.58±1.12)和健康对照组(0.80±0.49)(P<0.05),其转录因子Bcl-6m RNA相对表达量A组(2.56±0.61),B组(2.30±0.64),C组(2.02±0.49)均高于健康对照组(P<0.05)。3.不同的Tfh样细胞群与Bcl-6 m RNA相关性:CD4+CXCR5+ICOS+T细胞与Bcl-6m RNA正相关(r=0.559,P=0.000);CD4+CXCR5+T细胞与Bcl-6 m RNA正相关(r=0.275,P=0.032)。4.不同的Tfh样细胞群与B(CD19+)细胞相关性:不同的Tfh细胞均与B细胞无关联(r=-0.102,P=0.363;r=-0.043,P=0.706)。5.不同的Tfh样细胞群与CD4+T细胞相关性:CD4+CXCR5+ICOS+T细胞和CD4+T细胞计数负相关(r=-0.749,P=0.000);CD4+CXCR5+T细胞和CD4+T细胞负相关(r=-0.731,P=0.000)。结论1.HIV/AIDS发病过程中Th1/Th2细胞失衡,Tfh细胞数量异常,与CD4+T细胞负相关,提示Tfh细胞可能与HIV/AIDS疾病进展有关。2.在HIV/AIDS患者PBMC中高表达Bcl-6 m RNA、T-bet m RNA和GATA3m RNA,提示Tfh细胞、Th1以及Th2细胞参与了HIV/AIDS的发生发展。
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