林蛙“红腿病”两种诊断方法的比较研究

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林蛙“红腿病”是危害林蛙养殖业的主要疾病,该病具有发病快、传播快、病死率高等特点。传统的诊断该病的方法为细菌的分离及鉴定,该方法是诊断的最可靠方法,也是验证诊断性实验的标准,在培养基上发现典型菌落,经涂片染色、镜检、生化鉴定即可确诊,同时又可做药敏试验,也是其他诊断试验的参考标准。但细菌培养需要的时间长,影响因素较多,标本的采集和处理、培养基的成份与培养条件、取材的部位及操作技术等均可造成漏检。因此需要快速、特异性高的诊断方法。为了快速检测出延边林蛙红腿病病原嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH),本试验根据针对检测林蛙“红腿病”已建立的特异性和敏感性较高的聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)和荧光抗体技术(indirect fluorescent antibody technique, IFA)对采自延边地区32只的林蛙样本的“红腿病”感染情况进行检测。检测结果表明在延边地区32只林蛙中,IFA的阳性数为14只,阴性数为18只。和PCR法共同检出阳性林蛙14只,阴性4只,PCR法阳性率为87.5%。IFA法相对于PCR法的灵敏度为50%(14/28),特异性为22.22%(4/18),IFA的阳性检出率为43.75%(14/32)。为林蛙“红腿病”的快速检测提供了理论依据。
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