生物组织半自动塑性包埋方法与装置

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人类从未停止过对脑的探索,但至今依然无法解释大脑的运行机制。与此同时,神经退行性疾病日益成为人类的健康负担,人类希望知道:大脑是如何工作的。神经细胞是研究脑功能的基础,但其形态跨越了从宏观到微观六个量级的尺度。因此,现代神经科学领域迫切地需要一种工具,能够在全脑大尺度范围内获取神经细胞亚微米级别的精细结构。实验室发展了荧光显微光学切片断层成像技术,获取了全脑范围内神经纤维的长程投射以及树突棘的精细结构。该系统需要对样品进行微米级的切削,样品必须进行塑性包埋以满足精密切削和长时间稳定成像的需求。针对需求,实验室成功发展了大体积样品塑性包埋的方法,已广泛用于小鼠全脑的成像。该方法共有30个操作步骤,持续时间长达168小时。目前全部由手工完成,操作繁琐且制备参数不统一。为了简化样品制备的操作过程,提高包埋成功率与科研实效率,本文提出并设计了一套半自动化的塑性包埋方法。通过对手工制备环节的分析与提炼,结合电路、机械等工程技术的知识,制作了自动配液与换液装置以及自动调温恒温箱。自动配液与换液装置实现了漂洗、脱水、渗透等样品处理过程的自动化,自动升温恒温箱实现了树脂聚合阶段的自动化。通过这两套仪器,实验员只需要少量的人工操作即可实现对样品的塑性包埋,即实现了生物组织的半自动塑性包埋。半自动化的塑性包埋方法不仅提高了科研人员的工作效率,而且统一了样品制备的参数,一定程度上解决了样品制备操作繁琐带来的问题,为进一步稳定成像质量奠定了坚实的基础。
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