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[目的]循经低阻抗特性是经络研究中得到认可度较高的经络特性之一,有学者指出,经脉线上组织液含量丰富是导致经络低电阻的原因。然而,目前对经络低阻抗的测量技术尚不能有效地区分低阻抗成分中细胞外液(包括组织液和血液,比例约为3:1)和细胞内液对整体阻抗的贡献,这个问题的解决对于经络实质的研究意义重大。本研究拟以足阳明胃经大腿段为试验部位,研究区分细胞内外液电阻抗的方法,结合经线上与经线外的微循环血流量,估算组织液的相对含量,从而探索循经低阻抗特性的生物学本质,进一步认识经络的实质。[方法]首先,通过使用本实验室的生物阻抗谱测量系统测量受试者改变体位时细胞内外液的变化,验证该系统的可靠性;然后使用该生物阻抗谱系统测量经脉线上和旁开部位的阻抗,分别计算两者细胞外液和细胞内液的差异百分比;再通过激光多普勒血流成像仪测出经脉线与旁开部位的微循环血流量差异百分比,最终估算出经脉线上与旁开部位组织液含量的差异百分比。1.生物阻抗谱技术生物阻抗谱测量系统采用美国EG & G公司制造的Signal 7280宽频带数字锁相放大器(输出电流50μA,频率为1-100KHz正弦交流信号),经差动恒流源形成恒流信号,连接2个上海钧康医用设备有限公司生产的直径lcm一次性心电极片,作为供电电极。另2个一次性心电极片置于供电电极中间,作为探测电极,测量目标部位在1-100kHz的13个频率下相应的电压值V和相角值θ(相角差)。将V和e输入MATLABR2O11a软件,通过Cole-Cole拟合程序计算出细胞内外液阻抗R;和R。,结合测试部位的周长计算出细胞内外液电阻率ρi和ρ。。2.激光多普勒血流成像技术使用PeriScan PIM II型激光多普勒血流灌注成像仪(瑞典百灵威公司)以及LDPI2.6图像软件。参数设置为:NR扫描模式,中分辨率扫描精度,64×64个采样点,扫描范围约为5cm×5cm。在暗光状态下,激光多普勒血流灌注成像仪探头扫描目标部位的微循环灌注图,文件存档。使用LDPI2.6软件截取出感兴趣区域图并计算该区域的平均微循环血流灌注量。实验一 使用生物阻抗谱技术观察不同体位对人体小腿细胞内外液的影响受试者为15名平均年龄为27.9±7.1岁的健康成年人。实验室温度为26±1℃,受试者仰卧于倾斜角度可调节的检查床上30min后试验开始。测量时间点分别为水平位(HP)30min,11°头高位倾斜(HUT) 20min和30min、11°头低位倾斜(HDT)20min和30min。采用本实验室设计的生物阻抗谱测量系统测量并计算出小腿在五个时间点的细胞内外液电阻率ρ3和ρe。实验二使用生物阻抗谱技术对胃经大腿段细胞内外液分布的初步观察受试者为21名平均年龄为35.81±11.49岁的健康成年人。受试者仰卧于水平检查床上,先按照经穴标准定位中的方法确定胃经大腿段的循行线并从中取5cm作为测量部位,然后在其外侧的股外侧肌肌腹上取相同水平并与之平行的5cm作为非经线的测量部位。受试者平躺30min后,采用本实验室设计的生物阻抗谱测量系统测量并初步计算出胃经大腿段经线上与旁开非经线细胞内外液电阻率pi和ρe。实验三使用激光多普勒血流仪对胃经大腿段血流量的测量受试者与试验要求同试验二。采用Peri scan PIM2型激光多普勒血流灌注成像仪测量并计算出胃经大腿段经线与旁开非经线部位的微循环血流灌注量。[结果]实验一使用生物阻抗谱技术观察不同体位对人体小腿细胞内外液的影响在受试者的体位改变过程中,细胞内外液电阻率pi和ρ。的变化有统计学意义。由于细胞内外液的电阻率与其含量成反比,故实验结果可表述为,受试者从水平位转到11°头高位倾斜20min后,小腿的细胞外液增多;由11°头高位倾斜转到11°头低位倾斜20min后,小腿细胞外液减少,到30min时细胞外液量降到最低,且低于水平位的细胞外液量,其变化规律相对于时间因素用Friedman秩和检验具有极显著性差异(P<0.01)。细胞内液的变化规律为:受试者从水平位转到11°头高位倾斜30min后,小腿细胞内液增多;由11°头高位倾斜转到11°头低位倾斜30min后,小腿的细胞内液减少,且低于水平位的细胞内液量,其变化规律相对于时间因素用Friedman秩和检验具有极显著性差异(P<0.01)。此外,结果还显示在两次改变体位过程中,细胞内液量的变化(改变体位后30min)都滞后于细胞外液量的变化(改变体位后20min)。实验二使用生物阻抗谱技术对胃经大腿段细胞内外液分布的初步观察结果显示,大腿前面的胃经与非经线的细胞外液电阻率分别为571.6±357.6Ωcm和666.3±586.7Ωcm,其差异百分比为17.89%,有极显著性差异(P<0.01),说明经脉线上的细胞外液更加丰富;大腿前面的胃经与非经的细胞内液电阻率分别为461.7±301.4Ωcm和45 0.2±527.0Ωcm,无显著性差异,说明经脉线与旁开部位的细胞内液含量差异不大。实验三使用激光多普勒血流仪对胃经大腿段血流量的测量大腿前面的胃经与非经部位的微循环血流灌注量均值分别为0.4714±0.1947PU和0.4285±0.1768PU,差异百分比为9.1%,有极显著性差异(P<0.01),说明经脉线上的血流量较经脉线外多。结合实验二的结果推算出大腿前面的胃经比非经部位组织液量多约8.79%。[结论]本研究使用的生物阻抗谱技术可以检测并计算出细胞内外液比例的变化,实验结果初步证明了胃经大腿段的经脉线上较旁开非经线部位具有更丰富的细胞外液,而细胞内液在两个部位的差异不大,说明经脉在细胞组织方面没有明显的差别,其差异主要体现在细胞外成分上。在相同的部位使用激光多普勒技术发现,经脉线上的血流量较非经部位高,说明胃经上的血流量和组织液量都较为丰富,与中医理论中经络是气血运行通道的观点相吻合,并且与胃经多气多血的描述相近似,支持了以谢浩然、张维波为代表的经络体液通道学说的观点。