IL-18联合IL-2诱导的NK92细胞对卵巢癌免疫治疗作用的实验研究

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目的: 探讨白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)联合白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)诱导自然杀伤细胞系NK92(natural killer cells line NK-92)的体外增殖及诱导后的NK92细胞对人卵巢癌浆液性细胞株(human ovarian serous cancer cell strain,SKOV3)的体外杀伤作用。 方法: 用不同浓度的IL-18(1、10、25、50、100ng/mL)联合低浓度的IL-2(5U/mL)体外诱导刺激NK92细胞,实验分为:IL-2单独刺激组、IL-18单独刺激组、IL-18+IL-2联合刺激组及对照组(未经细胞因子刺激)。甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度IL-18、IL-2对NK92细胞的促增殖活化作用,筛选最佳刺激浓度。采用流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)检测刺激后NK92的细胞周期变化。乳酸脱氢酶释放法(lactate dehydrogenase releasing method,LDHRM)观察诱导前后、不同效靶比的NK92细胞在不同时相点对卵巢癌细胞SKOV3的体外生长抑制作用。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定NK92细胞杀伤活性最大时,细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的含量。 结果: 1.NK92细胞经不同浓度IL-18、IL-2作用后增殖出现变化,结果显示,IL-18浓度为25ng/mL诱导24h时,对NK92细胞促增殖作用最佳,OD
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