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本实验分别以分批培养和连续流培养的方式利用纯菌种Ethanologenbacterium sp. nov R3进行厌氧发酵生物制氢。底物采用水果加工业产生的废弃物(废水、废渣)。以期在生产氢气的同时,还能对废弃物达到降解作用。在分批培养实验中,分别采用苹果加工业废渣和橙子加工业废渣为底物;在连续流实验中,采用葡萄饮料废水为底物。探讨了,在不同底物、不同培养方式条件下,Ethanologenbacterium sp. nov R3发酵产氢的最佳工艺控制参数。实验得出主要结论如下:在纯菌种R3分批培养试验中,以苹果工业废渣为底物,在苹果泥用量为400g/L,培养液初始pH值为6.0,反应系统温度控制在30℃~35℃的条件下,反应系统达到最佳运行状态。此时,氢气产量和氢气含量分别达到423.51ml/L和48.9%;细胞浓度为0.224g/L;平均产氢速率达到2.021mmolH2/gCDW·h。乙醇、乙酸含量分别为1896.51 mg/L、1032.88 mg/L。发酵液终pH值为3.33;以橙子工业废渣为底物,在橙子用量为100g/L,培养液初始pH值为6.5,反应系统温度控制在25℃~35℃的条件下,系统达到最佳状态。此时,氢气产量和氢气含量分别达到540.94ml/L和50.5%;细胞浓度为0.27g/L;平均产氢速率达到1.988mmolH2/gCDW·h;乙醇、乙酸含量分别为1906.8 mg/L、1200.27 mg/L;发酵液终pH为3.13。以上结论说明:以橙子废渣为底物菌种Eethanologenbacterium sp. nov R3产氢效能更好,橙子中的碳水化合物更容易被其利用进行发酵产氢。但橙子中所含抑制Ethanologenbacterium sp. nov R3细胞生长的物质较苹果多,一旦橙子用量较高,菌种的细胞浓度和氢气产量都大幅下降。采用纯菌种Ethanologenbacterium sp. nov R3为产氢菌株,以葡萄饮料废水为底物,利用CSTR反应器进行连续流厌氧发酵制氢,反应器进入稳定运行阶段,生物气产量和氢气含量可达4.66L/d和58.96%;COD去除率为26%左右;发酵类型为乙醇型发酵;出水pH值在3.5左右。在连续流实验中,调节进水pH。进水pH值为5.5,Eethanologenbacterium sp. novR3的厌氧发酵产氢能力最强。此时,生物气量和氢气含量分别达到6.85~8.86L/d和59.44%-65.13%。COD去除率仍为26%左右,出水pH值在4.38左右,达到了Eethanologenbacterium sp. nov R3适宜的生态位。在总挥发酸中,乙醇和乙酸的平均浓度分别是706mg/L和446mg/L。整个过程中,Eethanologenbacterium sp. nov R3始终保持乙醇型发酵特性。