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目的:采用线栓法制备较符合人类常见缺血性卒中(Stroke)类型的大鼠缺血/再灌注(Ischemia/reperfusion)模型,证明缺血后适应(Ischemic postconditioning)对大鼠脑缺血/再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)损伤的保护作用;初步探讨研究脑缺血后适应对大鼠缺血性脑损伤保护作用的机制,为临床治疗提供一种新的可能的治疗策略。方法:本实验分为两部份进行,共用109只Sprague Dawley(SD)大鼠:(1)第一部分建立稳定、符合人类常见缺血性卒中模型的脑缺血后适应大鼠模型,证明缺血后适应对缺血脑组织的保护作用:将21只雄性SD大鼠随机分为线栓法阻塞大脑中动脉(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)建立的缺血/再灌注模型组(Ischemia/reperfusion group,Control)、夹闭单侧颈总动脉后处理组(MCAO+transient unilateral common carotid artery occlusion,u-CCA-O)和夹闭双侧颈总动脉后处理组(MCAO+transient bilateral common carotid artery occlusion,b-CCA-O),每组7只。分别于梗死即刻、梗死后10min、梗死后1h、拔栓后即刻、每次夹/松颈总动脉时、最后一次夹/松颈总动脉后处理干预后30min等15个时间点动态监测脑血流;再灌注后1h及处死大鼠前进行神经功能测定;于再灌注48h后处死大鼠,TTC染色测定脑梗死体积和脑水肿程度。(2)在证实缺血后适应脑保护作用后,第二部分进行后适应脑保护作用机制的探讨:将88只雄性SD大鼠随机分为Control组,b-CCA-O组。于缺血2h再灌注4h、8h、24h和48h处死大鼠,免疫组化定位半定量测定基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)水平;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定脑组织MMP-9含量;TUNEL染色测定神经元凋亡水平。结果:1.u-CCA-O组、b-CCA-O组和Control组脑血流各个时间点无明显差异(P＞0.05),但是b-CCA-O组最后一次夹/松颈总动脉后处理干预后30min脑血流百分比较Control组、u-CCA-O组降低9%;2.再灌注1小时后u-CCA-O组、b-CCA-O组与Control组相比神经功能评分显著降低(P＜0.05);3.u-CCA-O组、b-CCA-O组大鼠脑组织梗死体积与Control组相比显著减小(P＜0.05),u-CCA-O组梗塞体积较Control组减少了59.9%,b-CCA-O组梗塞体积较Control组减少了70.5%;4.Control组和b-CCA-O组大鼠分别于再灌注4h、8h、24h和48h灌注处死大鼠,行石蜡切片凋亡细胞TUNEL染色,结果示各时间点b-CCA-O组基底节与皮层交界区凋亡染色阳性细胞数较Control组显著减少(P＜0.05);5.u-CCA-O组、b-CCA-O组脑水肿程度较Control组显著改善(P＜0.05),u-CCA-O组脑水肿较Control组减少了33.0%,b-CCA-O组脑水肿较Control组减少了58.0%;6.Control组和b-CCA-O组分别于大鼠再灌注4h、8h、24h和48h灌注处死大鼠,冰冻切片行MMP-9免疫组化检测,结果示b-CCA-O组基底节区MMP-9免疫组化染色阳性细胞较Control组显著减少(P＜0.05);7.MCAO组和b-CCA-O组大鼠再灌注4h、8h、24h处死大鼠,脑组织匀浆后行双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测脑组织MMP-9含量,结果示b-CCA-O组大鼠8h、24h梗塞侧基底节区MMP-9含量较Control组显著降低(P＜0.05),4h组基底节区MMP-9含量较Control组稍有降低,但无统计学差异。结论:1、成功建立大鼠大脑中动脉栓塞缺血后适应模型;2、夹闭双侧颈总动脉后处理形成的缺血后适应不会引起大鼠基本生理指标的改变;3、最后一组夹/松颈总动脉后处理干预后30min,b-CCA-O组脑血流较Control组降低9%,减轻了缺血后再灌注早期的急性高灌注现象;4、缺血后适应能够明显减小大鼠大脑中动脉栓塞造成的梗塞体积,降低脑水肿程度;5、缺血后适应改善大鼠再灌注1h神经功能评分,由于神经功能评分是在再灌注1h测定的,排除了大鼠神经功能损伤后的自我恢复,说明神经功能的改善是由于缺血后适应引起的;6、缺血后适应减少再灌注4h、8h、24h、48h梗塞侧基底节与皮层交界区凋亡细胞数;提示缺血后适应可以减少缺血性神经元凋亡的发生,从而证实抑制缺血性神经元凋亡可能是缺血后适应发挥脑保护作用的一种途径;7、缺血后适应降低脑缺血后再灌注4h、8h、24h、48h梗塞侧基底节区MMP-9的表达。