TDZ和留果量对‘阳光玫瑰’葡萄果实香气物质组分及含量的影响及DXS基因的功能分析

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本文以‘阳光玫瑰’葡萄为实验材料,研究了 GA3、TDZ和不同留果量对‘阳光玫瑰’葡萄果实品质及香气组分与含量的影响,以及克隆了葡萄组织中的DXS基因,并进行亚细胞定位及特异性表达分析。主要结果如下:1、‘阳光玫瑰’葡萄在盛花期和盛花后两周分别用GA3和TDZ浸蘸果穗:25 mg·L-1 GA3,25 mg·L-1 GA3(CK);25 mg·L-1 GA3,25 mg·L-1 GA3+5 mg·L-1 TDZ(T1);25 mg·L-1 GA3+2 mg·L-1 TDZ,25 mg·L-1 GA3+3 mg·L-1 TDZ(T2);25 mg·L-1 GA3+3 mg·L-1 TDZ,25 mg·L-1 GA3+2 mg·L-1 TDZ(T3);25 mg·L-1 GA3+5 mg·L-1 TDZ,25 mg·L-1 GA3(T4)。结果表明,与 CK 处理相比,TDZ处理其果实单果重显著增加,果形指数显著降低;果实中总酚及总黄酮含量下降,T1、T4处理降低幅度显著低于T2、T3。在五组处理中,CK处理其果实甜度值及总糖量最高;相比T1、T2、T3处理,T4处理其果实总酸量及酒石酸含量较低。与CK处理相比,TDZ处理其果实香气物质种类减少,果实中带有草香味的己醛和己烯醛含量显著增加,带有玫瑰香味的萜烯类物质总量减少;在所有TDZ处理组中,T4处理其果实萜烯类物质含量占香气物质总量比例最高。2、不同留果量处理对葡萄果实品质影响较大。40粒留果量处理其果穗紧凑、果粒饱满、色泽均匀,60粒处理其果粒偏小、果穗稀疏,80粒处理其果实成熟不一致、大小果现象严重。三种处理间葡萄果实可溶性固形物含量差异不显著,但40粒果实可滴定酸含量显著较低。在果实成熟期,相比较其他处理,40粒果实中萜烯类物质如芳樟醇含量较高,60粒果实C6化合物含量较高;在果实发育过程中,相比较其他两处理,40粒果实其各种萜烯物质含量下降速率较慢,且某些萜烯类物质如顺式氧化芳樟醇、香茅醇保留时间延长;转录分析表明VvDXS转录表达受留果量处理影响较大,与萜烯类物质总量呈极显著相关关系,并且40粒果实其VvDXS整体表达水平高于其他处理。3、通过对‘阳光玫瑰’葡萄不同组织进行DXS基因克隆,结果发现,VvDXS1和VvDXS3的开放阅读框(ORF)大小分别为2151 bp、2160bp;编码氨基酸数目分别为716个、719个;均含有DXPsynthaseN、Transketpyr和TransketolaseC三个保守功能结构域,并且在DXS1中还预测到与DXPsynthaseN结构相似的EI亚基。通过与不同物种进行同源性序列比对发现其在进化过程中高度保守,并且C端结构域相对于N端结构域保守性更强;系统进化树分析表明DXS1与甜橙和长春花的亲缘关系较近,DXS3与青蒿、沉香、拟南芥亲缘关系较近。亚细胞定位结果表明该两基因编码蛋白均定位于叶绿体中。转录水平分析表明,VvDXS1和VvDXS3在葡萄不同组织及不同发育时期均表达,且DXS1的表达水平明显高于DXS3。因此推测VvDXS1和VvDXS3均参与调控MEP代谢途径,且DXS1在该代谢途径中起主要调控作用,而DXS3则是辅助性调控作用。
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