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研究背景支气管哮喘是一种以气道高反应性、气道炎症和气道重建为特征的慢性呼吸道疾病,目前已在世界范围内成为引起肺功能损害的重要疾病之一。最近的研究表明,哮喘气道重建是造成哮喘难以治愈的主要原因。大量的研究表明:在受到特定的外界环境激发后,哮喘患者气道中所产生的大量炎症介质可以刺激体外培养的气道平滑肌细胞增殖,并使其表达多种细胞粘附分子和分泌大量细胞因子。而且,在慢性哮喘患者的气道中,气道重建的进程会因气道平滑肌细胞的持续增生而不断加强。因此,为了达到临床控制哮喘的目的,抑制哮喘气道重建的过程变得越发关键。他汀类药物是一种人工合成的新的HMG-CoA抑制剂,这类药物的药理作用目前已经远远超出了其原有的调脂作用。其中就包括了通过抑制异戊二烯化必须基团的合成而降低ras相关蛋白的活性,从而抑制细胞增殖的作用。最新的研究提示,脂溶性的HMG-CoA抑制剂可以在体外实验中部分抑制血管紧张素-Ⅱ所诱导的新生儿心肌细胞的增生,这种作用已经被证明是通过抑制了p21ras/蛋白激酶A途径而实现的。癌基因ras表达的GTP-耦联蛋白p21ras与细胞增殖密切相关,其生物活性高低取决于其细胞膜定位。而膜定位所必须的异戊二烯化过程则有赖于羟甲基戊二酰辅酶A复合物的生成。既往的研究已经证实:可以通过减少甲羟戊酸的生成抑制HMG-CoA复合物的形成,进而干预ras基因表达的GTP-耦联蛋白的生物活性。目前,关于HMG-CoA抑制剂在体内是如何作用于ras系统和其下游细胞增殖周期的调节因子的问题,尚未得出明确的结论。第一部分目的:观察羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂氟伐他汀对大鼠哮喘模型气道重建的影响.方法:将40只SD雄性大鼠随机分为4组:空白对照组(A组),哮喘组(B组),地塞米松组(C组),氟伐他汀组(D组)。以10g/L卵白蛋白(Ovalbumin ,OVA)腹腔注射致敏并长期吸入激发制备慢性哮喘模型.用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中PCNA,p21ras和Ⅲ型胶原的表达,同时图象分析方法测量气道壁内周长,平滑肌面积。结果:①氟伐他汀对气道重建具有抑制作用:D组的WAm /Pi、Ⅲ型胶原和PCNA表达分别为4.44±0.95μm2/μm、32±6和38±10,明显低于B组[(7.01±1.54)μm2/μm, 55±8, 68±12] ,p均<0.05;②氟伐他汀组对气道重建的抑制作用弱于地塞米松组:D组的WAm /Pi,Ⅲ型胶原和PCNA表达水平高于C组[(3.14±1.06)μm2/μm,21±6,26±6] (p<0.05);③D组p21ras表达的吸光度值(24±11)明显低于B组(57±10) (P<0.05)。p21ras表达与PCNA和Ⅲ型胶原的表达分别呈正相关(rs =0.685, rs=0.530,P均<0.05)。结论:氟伐他汀可延缓哮喘气道重建的进程,这种作用与p21ras抑制相关,但其抑制增生的作用弱于地塞米松。第二部分目的:探讨氟伐他汀对哮喘气道平滑肌增生的影响。方法:大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)复苏,传代培养,MTT法观察细胞增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:氟伐他汀对由组胺、血清刺激增生的ASMC有明显的抑制作用,这种抑制作用具有剂量和时间的依赖性。MTT法检测A490nmFlu组明显低于同时间点对照组(P<0.05), 10 -4mol·L -1 Flu组(0.31±0.02)与2×10-6 mol·L-1地塞米松组(0.31±0.04)无显著差别(P>0.05)。流式细胞仪检测显示:细胞分裂多数停滞于G1期,与对照组比较G1期细胞比例增加(P<0.05)。结论:氟伐他汀能够有效抑制气道平滑肌细胞增生,这种抑制作用具有时间和剂量依赖性。且氟伐他汀(10 -4mol·L -1)在体外能取得与地塞米松(2×10-6 mol·L-1)相近的抑制效果。氟伐他汀对哮喘气道重建具有抑制作用。