乳酸菌是一种广泛存在于人畜肠道内的益生菌,因其拥有多重保健功能而被人们广泛开发利用。但其在生长过程中会受到源于自身和外界环境中的各种胁迫而造成生长抑制。γ-氨基丁酸(GABA)作为一种广泛存在于生物体内的非蛋白质氨基酸,参与了多种生物体的生长发育和抵御环境胁迫过程,可能有助于乳酸菌抗胁迫能力的提高。因此,研究GABA在乳酸菌增殖过程中所扮演的角色具有重要的意义。本研究通过对乳酸菌外源添加一定浓度的GABA和内源表达产GABA的GAD基因两种方式,尝试为改良乳酸菌生长状态提供可能途径以及获得高产GABA乳酸菌。主要内容如下:1.外源添加GABA对乳酸菌在酸胁迫条件生长状况的影响分析本研究通过测量生长曲线观察乳酸菌生长状况的变化。其中在正常情况下乳酸菌的细菌浓度没有发生明显变化,但是在酸性条件下添加GABA的乳酸菌细菌浓度有轻微的增长。2.外源添加GABA对乳酸菌在低温胁迫条件下生长状况的影响分析本研究将在添加GABA培养基中培养至对数期中期、稳定期前期、稳定期后期的乳酸菌分别置于4℃和-20℃的温度下,观察其生长个数的变化。我们发现:3个不同时期乳酸菌的生长量与生长状况都不同,但是随着低温处理时间的延长,培养基中添加GABA的乳酸菌的存活优势明显高于培养基未添加物质的乳酸菌。3.含茶GAD(谷氨酸脱羧酶)的乳酸乳球菌的生长状况的分析本研究通过基因工程的手段将一段茶树GAD导入乳酸乳球菌NZ9000中,观察所得基因工程菌经nisin诱导后在培养基为酸性的条件下生长曲线的变化情况以及不同生长时期在低温处理下的存活个数。研究发现当培养基在添加诱导剂nisin溶液时,重组菌的细菌浓度会增长。在低温至一定时间的条件下,重组菌在3个时期的存活个数显著多于对照菌。