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背景：测定25-OHD目前主要有放射免疫法(RIA)、酶联免疫法(ELISA)、液相色谱法(HPLC)、电化学发光法以及近几年发展较快的液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)。因为LC-MS/MS灵敏度高,很多研究中把它作为“金标准”。有文献报道维生素D对结核以及糖尿病都有一定关系,我国的结核病和糖尿病人数众多,但关于维生素D在结核病和糖尿病人群中水平的研究较少,而且肺结核合并糖尿病或者肺结核合并血糖升高的人群维生素D水平的变化在国内没有相关报道。目的：拟建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血清25羟维生素D3(25OHD3)的方法,观察伴或不伴血糖水平升高的肺结核患者血清维生素D浓度的变化,并分析相关影响因素。方法：收集578名研究对象的一般资料,根据空腹血糖6.1mmol/L将病例组和对照组各分为两个组,血糖正常组(对照组：3.9mmol/L<血糖<6.1mmol/L);单纯高血糖组(对照组：血糖≥6.1mmol/L);单纯肺结核组(病例组：3.9mmol/L<血糖<6.1mmol/L);肺结核合并高血糖组(病例组：血糖≥6.1mmol/L)。采用LC-MS/MS法测量血清中25-OHD3的浓度。结果：LC-MS/MS法25-OHD3浓度在6ng/ml～120ng/ml范围内,峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999)。同时用放射免疫法检测53例血清样本,两种方法的相关性良好,RIA=LC-MS/MS-3.57,相关系数为0.883。25-OHD3的水平血糖正常组(16.75ng/ml)和单纯高血糖组(19.70ng/ml)均显著高于单纯肺结核组(11.10ng/ml)(P<0.001);单纯高血糖组也显著高于肺结核合并高血糖组(16.70ng/ml)(P=0.008)；血糖≥6.1mmol/L的研究对象(18.83ng/ml)和血糖正常组差别没有统计学意义(P>0.05),与单纯肺结核组差别有统计学意义(P<0.001)；肺结核患者25-OHD3的水平(13.70ng/ml)显著低于血糖正常组(P<0.001)和单纯高血糖组(P<0.001)。无论血糖水平是否升高,肺结核患者维生素D严重缺乏率均比非肺结核者高。维生素D在不同的年龄、性别、体重指数之间没有显著差异。结论：维生素D的LC-MS/MS检测法与RIA相关性好。与非肺结核人群相比,肺结核患者的25-OHD3的水平降低,严重缺乏率升高。无论病例和对照,血糖升高的25-OHD3水平比血糖正常的高。