【摘 要】
：
研究背景:颞下颌关节与咬合的关系非常密切,我课题组最新研究结果显示,双侧前牙咬合抬高（Bilateral anterior elevation,BAE）可促进小鼠髁突软骨细胞增殖、软骨增厚。甲状旁腺相关蛋白（Parathyroid hormone-related protein,PTHr P）是髁突浅层软骨细胞分泌的大分子蛋白,在促进细胞增殖活动中发挥着重要的作用。钙离子敏感受体（Cal Cium
论文部分内容阅读
研究背景:颞下颌关节与咬合的关系非常密切,我课题组最新研究结果显示,双侧前牙咬合抬高（Bilateral anterior elevation,BAE）可促进小鼠髁突软骨细胞增殖、软骨增厚。甲状旁腺相关蛋白（Parathyroid hormone-related protein,PTHr P）是髁突浅层软骨细胞分泌的大分子蛋白,在促进细胞增殖活动中发挥着重要的作用。钙离子敏感受体（Cal Cium sensing receptor,Ca SR）是广泛表达于细胞膜上的受体蛋白,对钙信号非常敏感,Ca SR可激活一系列下游信号,发挥重要的生物学功能。本研究的目的是利用包括特异性敲除髁突浅层软骨细胞Ca SR或PTHr P基因等技术在内的分子生物学研究方法,探索BAE刺激下髁突浅层软骨细胞Ca SR、PTHr P信号的激活情况,并结合离体加载实验,论证髁突浅层软骨细胞对BAE刺激的反应规律及其Ca SR-PTHr P信号调控机制。材料与方法:1.将36只6周龄雌性C57BL/6J小鼠随机等分为3周、7周以及11周组,每个时间点又分为对照组（Contral,CONT）与BAE组（n=6）。所有BAE组均在小鼠6周龄给予BAE刺激,CONT组小鼠除了给予BAE刺激外,其余操作均与BAE组相同。分别在造模3周、7周以及11周末进行取材并进一步检测小鼠髁突软骨的形态学改变。2.显微镜下分离3周SD大鼠髁突浅层软骨细胞并进行体外培养。利用Si RNA以及激动剂抑制或激活体外培养细胞的Ca SR和PTHr P的表达,并对细胞施加2h强度为16dyn/cm~2的流体剪切力（fluid flow shear stress,FFSS）刺激,然后收集加力后的细胞,用蛋白免疫印记技术（Western blotting,WB）检测细胞增殖与分化相关分子的表达。3.利用条件鼠Ca SRflox/flox与工具鼠Prg4-Cre ERT2杂交得到可由它莫西酚（Tamoxifen,Ta M）诱导的并能够在髁突表达Prg4的浅层软骨细胞中特异性敲除Ca SR基因的转基因小鼠(Ca SRflox/flox;Prg4-Cre ERT2)。用同样的方法得到特异性敲除PTHr P基因的转基因小鼠(PTHr Pflox/flox;Prg4-Cre ERT2)。小鼠6周龄时腹腔注射Ta M,连续注射5天,注射第二天给予BAE刺激,9周龄时关节周注射Ca SR激动剂（cinacalcet Hcl,Cina）或PTHr P激动剂(PTHr P87-139片段)。13周末取材并用化学染色和免疫组织化学染色观察小鼠髁突浅层软骨形态学变化以及细胞增殖与分化相关分子的表达。主要结果:1.对野生型小鼠施加BAE刺激,可见小鼠髁突浅层软骨细胞明显增多,软骨增厚,并且与对照组相比,从第3周开始BAE组髁突浅层软骨Ca SR阳性细胞率明显增加,PTHr P阳性细胞率也从第3周开始增加（所有P＜0.05）。2.体外实验结果显示,FFSS能够诱导髁突浅层软骨细胞的增殖与早期分化,表现为Ca SR、PTHr P、Ki67以及印度刺猬因子（Indian hedgehog,Ihh）蛋白表达水平增高（所有P＜0.05）。Cinacalcet或PTHr P87-139片段会进一步加强FFSS对髁突浅层软骨细胞的促增殖、促早期分化作用（所有P＜0.05）,而对Ca SR或PTHr P进行Si RNA转染后则会抑制FFSS对髁突浅层软骨细胞的促增殖、促早期分化作用（所有P＞0.05）。更加重要的是,激动Ca SR或敲低Ca SR的表达,对PTHr P的表达分别具有促进和抑制作用（所有P＜0.05）,而激动PTHr P或敲低PTHr P则对Ca SR的表达没有明显影响（所有P＞0.05）。3.转基因小鼠体内实验结果显示,敲除Ca SR或PTHr P基因后,均可阻止BAE诱导的髁突浅层软骨细胞的增殖与早期分化（所有P＞0.05）。4.在体实验表明,当敲除PTHr P基因的同时关节周注射Ca SR的激动剂Cinacalcet,也可阻止BAE诱导的髁突浅层软骨细胞的增殖与早期分化（所有P＞0.05）。但是,当敲除Ca SR基因的同时关节周注射PTHr P87-139片段,则不会阻止BAE诱导的髁突浅层软骨细胞的增殖与早期分化（所有P＜0.05）。结论:1.髁突浅层软骨细胞中,Ca SR可以作为PTHr P的上游分子,发挥促进髁突浅层软骨细胞的增殖与早期分化的作用。2.Ca SR-PTHr P信号通路在BAE及FFSS促进髁突浅层软骨细胞的增殖与早期分化的调控过程中,发挥着重要作用。
其他文献
大件货物系固稳定性是公路运输安全首要考虑的因素,运输过程中的货物质量、车辆行驶速度、路面不平度等因素将会导致系固索具发生松动或断裂,对大件货物系固稳定性造成一定影响。故对大件货物稳定性预测技术进行研究,具有重要的学术意义和工程实用价值。本文主要针对多因素下大件货物稳定性预测技术展开研究。在对国内外相关技术研究的基础上,提出一种基于6-SPS并联机构的车辆-货物系统设计方案,该方案由系固结构、系固索
研究目的:通过有限元分析和体外力学性能测试,研究在不同骨密度下选择个性化设计的螺纹形状、螺纹间距、有无切槽的微种植体稳定性研究。并且通过生物学性能实验,对比钛合金微种植体支抗与弹性模量较低的镍钛合金微种植体支抗在不同加载时间对生物性能的影响,为临床选择施加载荷时机和种植体支抗新材料的选择提供理论基础。研究方法:结合正交试验,通过有限元分析方法和体外力学测试分别以螺纹形状、螺距、骨条件、切槽、拔出角
杀鱼爱德华氏菌（Edwardsiella piscicida）是一种严重危害到淡水和海水养殖业的革兰氏染色阴性病原菌。双组分调控系统（TCS）在革兰氏阴性菌中广泛存在其在应对环境变化过程中发挥着重要作用。近年来,双组分系统受到众多研究学者的广泛关注,而关于杀鱼爱德华氏菌中的TCS研究却非常有限,其中对于EnvZ/OmpR双组分系统的研究更是鲜有报道。因此,本研究对双组分系统EnvZ/OmpR中Om
目的:多孔钛合金植入物的表面改性,如在试件表面和孔隙内部形成软的水凝胶,通过提供亲水表面诱导骨长入孔隙内部,进而用来改善钛植入物与周围骨组织之间的相互作用。本文系统地评估了3D打印多孔钛合金表面和孔隙内部形成水凝胶的物理性能和生物相容性。方法:采用3D打印技术制备多孔钛合金植体试件,对试样进行喷砂处理并超声清洗,采用光固化的方法在多孔钛合金表面和孔隙内部形成丝素蛋白水凝胶,对形成的水凝胶进行表面表
目的 研究在产后乳汁淤积中予以中药封包和经络推拿的效果。方法 选取上栗县妇幼保健院100例产后乳汁淤积产妇为样本，纳入时间2019年3月—2021年7月，采用随机数字表法将产妇均分为50例实施经络推拿手法治疗的对照组和50例实施中药封包联合治疗的观察组。对比2组产妇的治疗效果、首次通乳时间、具体疼痛程度、母乳喂养质量、生活质量、心理状态、治疗依从性。结果 观察组治疗效果、母乳喂养质量、生活质量、治
连年耕种和化肥不合理施用使得三江平原土壤生态功能减弱,生物多样性减少,农田生态系统保护修复迫在眉睫。生物炭以“黑色黄金”逐渐走入研究人员视野,其具有较大的比表面积和多孔性等优良特性,有利于土壤质量改良,在调节土壤理化性质的同时调理微生物种群繁殖、活力和多样性。鉴于此,建立一维垂直、水平入渗试验测定水分运移及模型参数变化并建立室内模拟培养土柱,按土壤质量的0%（CK）、1%（B1）、3%（B2）和5
目的本研究基于中国学生体质与健康调研中视力不良数据,通过分析2000-2014年7-18岁汉族学生视力不良流行特征及空间分布,建立空间回归模型;探讨视力不良的空间聚集性及空间回归模型在筛选视力不良宏观影响因素中的应用价值,为科学制定视力健康管理策略和优化公共资源配置提供理论依据。方法收集2000年、2005年、2010年、2014年7-18岁汉族学生视力不良横断面数据,采用Excel 2019和S
目的:建立大鼠单侧前牙反（Unilateral anterior cross,UAC）诱导的颞下颌关节骨关节炎（Temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA）模型,在此基础上通过全转录组测序筛选TMJOA的差异基因表达谱,明确内质网应激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）在TMJOA中的作用及探索其初步机制。方法:1.采用
目的:本项研究主要判断CXCL3在口腔组织及其鳞癌组织中m RNA和蛋白水平的差异情况及阐明其作用机理;探讨人口腔鳞状细胞癌HSC-4细胞中上调CXCL3对其恶性程度的影响。方法:通过R语言及Perl脚本,使用多个数据库分析CXCL3在口腔组织及其鳞癌组织中的表达情况,预后评价以及潜在的信号通路;此外还通过对口腔组织芯片进行免疫组化实验分析CXCL3的蛋白分布情况及其与患者数据之间的关联性;最后构
大型藻类是维持沿海海洋生态系统平衡的重要驱动力之一,大型藻类形成的海藻场对海洋生物的摄食、生长和繁殖等生命活动具有重要作用。然而,随着全球大气CO2浓度上升、海洋酸化和表层海水温度升高等一系列环境变化,以及陆源污染物入海、近海养殖污染等人为因素的影响,海藻场面积逐渐减小、退化现象极为严峻,海南省海藻场生态系统现状令人堪忧。因此,研究海藻场大型藻类的早期分布特征和物种多样性,将为海藻场的生态保护和生