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目的:分析重症监护病房（intensive care unit,ICU）耐碳青霉烯类肠杆菌（carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE）的感染危险因素和传播机制,为控制医院感染和暴发提供实验室及临床依据。方法:回顾性选择2016年1月至2019年6月在中山市人民医院ICU住院的196例医院感染患者。根据碳青霉烯类耐药检测结果,将患者分为CRE组（35例）和碳青霉烯类药物敏感组（对照组,161例）。分析ICU中CRE的病原菌分布及耐药特征,收集患者相关临床资料,使用Logistic回归的方法分析ICU患者CRE感染发生的危险因素;应用PCR对CRE进行耐药基因检测,分别应用脉冲场凝胶电泳（Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE）和基因外重复回文序列聚合酶链式反应技术（Repetive Extragenic Palindromic-polymerase Chain Reaction,REP-PCR）对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CR-KPN）和碳青霉烯类耐药大肠杆菌（carbapenem-resistant E.coli,CREC）进行同源性分析。结果:共检出CRE阳性病例35例,感染率为17.86%（35/196）。上述病例共分离68株肠杆菌科菌株,检出率最高为肺炎克雷伯菌（52.94%）,主要分布于ICU。其分离菌株对青霉素、头孢菌素和碳青霉烯类抗菌药物等均出现不同程度耐药,对多粘菌素和替加环素敏感。单因素分析显示,CRE组的年龄、入住ICU时APACHE II评分、ICU住院时间、机械通气时间、留置导管、血液透析、碳青霉烯类抗菌药物的使用、头孢菌素类抗菌药物的使用、联合用药均高于对照组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示APACHE II评分≥20分、使用碳青霉烯类抗菌药物、联合用药、机械通气时间≥3天、ICU住院时间≥10天是ICU患者CRE感染的危险因素（P<0.05）。耐药基因检测结果发现58株CRE菌株中KPC阳性38株,其阳性率为65.51%,测序验证均为KPC-2亚型;NDM基因阳性12株,阳性率为20.68%,测序验证均为NDM-1亚型;SHV基因阳性8株,阳性率为13.79%。CR-KPN的同源性发现存在6个克隆,克隆A,涉及四名患者;患者2和患者4的下呼吸道分离株同属克隆B。其余患者的临床分离株均属不同克隆。应用REP-PCR分析CREC同源性,17例患者仅有3例电泳图谱相似,提示可能同源。结论:病情严重程度、住院时长、机械通气、碳青霉烯类抗菌药物暴露史及多种抗抗菌药物联合使用是ICU中CRE感染的危险因素。我院CRE的耐药机制以携带KPC和NDM两种碳青霉烯酶基因为主。同源性分析结果表明我院ICU院内感染控制较好,管理工作落实到位,患者间的交叉感染极少发生。