【摘 要】
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目的 bFGF介导下,检测和分析体外培养的乳兔关节软骨细胞中p53、collagen-Ⅱ、telomerase、Bcl-2及Bax mRNA的表达及意义;探索bFGF对软骨细胞凋亡的调节作用。 材料与
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目的 bFGF介导下,检测和分析体外培养的乳兔关节软骨细胞中p53、collagen-Ⅱ、telomerase、Bcl-2及Bax mRNA的表达及意义;探索bFGF对软骨细胞凋亡的调节作用。 材料与方法 （一） 关节软骨细胞的培养及收集: 实验动物按随机、对照原则,配对分为实验组和对照组。无菌条件下分离3周龄日本大耳白兔股骨髁透明软骨,切成约0.5-1mm3大小碎块,加入Ⅱ型胶原酶,在37℃消化4小时。收集细胞,计数后均匀分装种植于25cm2培养瓶中（实验组加入10ng/ml的rhbFGF）,于培养箱内37℃、5%CO2条件下培养。培养3天后首次换液,以后隔日换液。细胞生长至约90%融合时,胰蛋白酶消化、传代、收集细胞,同时记录传代及收集时间。细胞传至第7代后全部收集。 （二） 观测指标: 1.大体及倒置显微镜: 观察细胞形态学变化及细胞增殖情况。 2.RT-PCR: （1） 提取各组细胞的总RNA （2） cDNA第一链合成 包括RNA模板变性和逆转录反应两个步骤 （3） PCR扩增 （4） RT-PCR产物半定量分析 （三） 统计学分析:统计分析软件采用SPSS11.5
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