载寡聚核苷酸的水溶性共轭聚合物聚苯撑乙炔的制备及抗肿瘤的初步研究

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人工合成的脱氧寡核苷酸(CpG ODN)可以模拟细菌DNA的免疫增强作用,因此人工CpG ODN可以作为治疗性DNA和免疫佐剂增强剂。但是,未修饰的CpG ODN通常易被机体内的核酸酶降解,CpG ODN的细胞摄取率低,因此需要反复给药和较高的给药剂量。本文合成了阳离子水溶性共轭聚合物聚对苯撑乙炔(PPE)纳米粒,PPE纳米粒不仅可以通过静电作用实现CpG ODN核酸分子负载,而且PPE纳米粒具有良好的生物相容性和荧光稳定性。因此,可作为理想的基因载体。本课题构建了新型的PPE基因载体用于负载CpG ODN,并进行了结构与性能的表征以及生物相容性和抗肿瘤效果的研究。主要研究工作如下:  (1)利用Sonagashira聚合法合成PPE纳米粒,采用核磁共振对PPE纳米粒结构进行了确认和表征;透射电镜表征PPE纳米粒的微观形貌;紫外分光光度计与荧光分光光度计对PPE纳米粒的光物理性质进行了分析;动态光散射法测定其粒径及表面电荷。合成的PPE纳米粒的平均流体力学粒径为275.1±3.1nm,多分散指数PDI为0.196±0.138,Zeta电位为41.7±3.6mV。  (2)PPE与CpG ODN的组装行为研究,研究了PPE-CpG ODN组装体的结构与性能。粒径和电位测定的结果表明当N/P>2时,CpG ODN与PPE纳米粒形成了稳定组装体。  (3)通过MTT法评价PPE纳米粒的生物相容性,结果表明,PPE纳米粒具有良好的生物相容性。  (4)建立H22肝癌荷瘤小鼠模型评价PPE-CpG ODN组装体的抗肿瘤效果。结果表明PPE-CpG ODN组装体比CpG ODN能更好的发挥抗肿瘤作用。  综上所述,PPE纳米粒通过静电作用能有效介导CpG ODN传递,用于抗肿瘤研究。
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