IL-2/抗IL-2抗体复合物体外诱导扩增外周血和骨髓CD56~+淋巴细胞的实验研究

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目的探索一种从人外周血单个核细胞(PBMC)和骨髓中高效扩增CD56~+细胞毒性淋巴细胞的方法。方法以干细胞生长培养基(SCGM)为基础培养基,设计IL-2/抗IL-2抗体复合物(IL-2和抗IL-2抗体按质量比1:20混合)实验组、相应因子浓度的IL-2、抗IL-2抗体以及IL-2+IL-15三组对照组,分别从PBMC和骨髓单个核细胞中诱导扩增CD56~+淋巴细胞,流式细胞仪分别检测外周血来源细胞第7、10天和骨髓来源细胞第7、14天的CD3/CD56表达率。用四甲基氮唑蓝(MTT)法检测其对肿瘤细胞株K562的杀伤活性,并分别与对照组激活的杀伤细胞进行比较。结果在以SCGM为基础培养基时,CD56~+淋巴细胞经IL-2/抗IL-2抗体作用获得大量增殖。在培养第7和第10天时,外周血实验组CD56~+细胞分别扩增了(24.67±3.14)和(31.63±5.01)倍;其中CD3~+CD56~+和CD3~-CD56~+细胞分别扩增(110.93±19.10)、(157.60±46.31)和(7.8±1.17)、(12.03±1.64)倍,与对照组相比,差别有统计学意义(P均<0.05);在培养第7和第14天时,骨髓实验组CD56~+细胞分别扩增了(11.08±2.08)和(21.72±2.19)倍;其中CD3~+CD56~+和CD3CD56~+细胞分别扩增(30.30±5.14)、(60.18±6.68)和(6.05±1.05)、(10.75±1.51)倍,与对照组相比,差别有统计学意义(P<均0.05);细胞效/靶比10:1时,外周血和骨髓实验组细胞对K562细胞的杀伤率分别为(83.46±1.56)%和(74.94±2.28)%;与同期对照组细胞相比具有更强的淋巴细胞毒性作用(P均<0.05)。结论在IL-2/抗IL-2抗体(IL-2/抗IL-2抗体质量比为1/20)符合物作用下,以SCGM为基础培养基,可获得大量以CD56~+淋巴细胞为主细胞毒性免疫效应细胞,为肿瘤过继免疫治疗提供了一种新的体外扩增CD56~+淋巴细胞的方法。
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