目的:　　 通过比较不同的培养方法、培养基和培养表面等确立肺癌细胞原代培养的方法,建立中国人的肺癌细胞株,并且对细胞系进行测序、生物学鉴定。同时比较中国人与白种人EGFR19号外显子缺失突变细胞系的生物学特性以及对酪氨酸激酶受体抑制药物的反应。材料和方法:　　 对238例肺癌样本进行原代培养,其中122例腺癌,110例鳞癌,3例大细胞癌和3例腺鳞癌。首先我们分别使用不同的培养表面、培养方法和培养液进行原代培养的比较,确定了原代培养的最优条件和方法。我们对其中一个细胞系的P53、EGFR的cDNA进行了测序,并且在DNA水平对cDNA的测序结果进行了确认。然后将这个细胞系与常用细胞系CRL5883比较了生长曲线、软琼脂克隆形成能力,三维培养、细胞周期和裸鼠成瘤实验,还通过荧光免疫杂交的方法了解了两种细胞EGFR在DNA水平的变化。最后检测了两种细胞对酪氨酸激酶抑制剂-厄洛替尼的敏感程度以及凋亡发生的情况。　　 结果:　　 1、肺癌细胞原代培养方法结果:　　 122例腺癌中有67例培养成功,为54.9％,110例鳞癌中有2例培养成功,为20.9％,3例大细胞癌和3例腺鳞癌中各有1例培养成功,分别为33.3％；鼠尾胶原处理过的培养瓶更有利于原代肺癌细胞的生长；机械溢出法和胶原酶消化法处理样本对原代培养成功率没有影响；对肺腺癌原代培养,ACL-4和C-based培养液较RPMI1640+10％FBS培养液成功率要高　　 2、S224细胞的基因型检测:　　 S224细胞P53 cDNA1206位点发生点突变(C-T),为错义突变(R337C),为P53基因10号外显子突变；S224细胞EGFRcDNA2483-2499的缺失突变和2500C-T错义突变,对应氨基酸delE746-S752insV,EGFR基因19号外显子突变。　　 3、S224与CRL5883生长特性的比较:　　 体外培养的S224的生长速度较CRL5883快；两者有着接近的非锚定依赖的克隆形成能力；三维培养提示S224可能侵袭能力比较强；FISH提示两者均为多倍体,EGFR基因拷贝数中等量增加。　　 4、Erlotinib对两种细胞的作用:　　 Erlotinib对S224的抑制较CRL5883高；Erotinib引起两种细胞凋亡和生长抑制。　　 结论:　　 1、我们确立了肺癌细胞原代培养的方法；　　 2、S224是是第一个有报道的中国人肺癌EGFR和P53突变的细胞系,生长速度和侵袭能力均较高加索人EGFR、P53突变细胞株强。　　 3、Erlotinib对S224生长抑制和诱导凋亡比CRL5883要强。