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背景与目的 心脏移植已成为治疗终末期心脏病的最主要的行之有效的方法,虽然已广泛应用如环孢素A、FK-506、硫唑嘌呤等免疫抑制药物,但心脏移植术后的主要并发症仍是排斥反应,而急性排斥反应是排斥反应中最常见的一种类型。治疗的关键在于如何早期确定急性排斥反应的严重程度以确定是否需用免疫抑制药物,在移植物造成细胞性损伤前逆转排斥反应,而目前缺乏理想的特异性监测及诊断方法。同种异体移植的急性免疫排斥反应是由多种细胞因子、效应细胞间复杂相互作用的结果。其中细胞免疫应答是急性移植排斥的主要原因。细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)是主要的效应细胞。现代移植免疫学研究发现,在CTL杀伤供体细胞的过程中,穿孔素(pefforin,PF)与颗粒酶(granzyme,Gzm)起了重要作用。本试验通过建立改良的Ono大鼠心脏腹腔异位移植模型,应用半定量逆转录聚合酶联反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction RT-PCR)动态检测在移植排斥反应过程中,心肌组织与外周血中的颗粒酶B基因mRNA的表达,以探讨颗粒酶B基因mRNA表达水平对心脏移植急性排斥反应的诊断价值。 方法 用成年清洁级近交封闭群雄性大鼠,250~300克,建立改良的Ono式大鼠腹腔异位心脏移植模型。设A组:Wistar到Wistar,为同系移植对照组;B组:SD到Wistar,为同种移植试验组,每组35只。各组分别在术后1、3、5、7、9天抽取下腔静脉血进行半定量RT—PCR,采集移植心脏进行半定量RT—PCR及组织病理学检查,检测颗粒酶B基因mRNA和急性排斥反应。 结果