论文部分内容阅读
随着工农业的发展,污水氮污染问题日益严重。本文以含无机氮(亚硝酸盐和肼)配水为研究对象,采用nirS基因重组工程菌体系、HZO基因重组工程菌体系和绿锈体系分别对亚硝酸盐氮、肼和亚硝酸盐氮降解处理。在基因重组工程菌脱氮体系中,着重考察实验的影响因素、细菌的性能,并探讨细菌脱氮的机理;实验对GRI-CO32-/NO2-体系的影响因素、Eh变化与还原产物的关系进行深入的讨论,并推导绿锈脱氮可能的反应方程式。主要研究结果和结论如下:(1).nirS基因重组工程菌脱氮实验表明,在NO2--N初始浓度为20mg/L和工程菌投加量30m L条件下,37℃、200rpm振荡反应600min,NO2--N去除率达80%以上。增加工程菌投加量(0m L至50m L)和NO2--N初始浓度(10mg/L至65mg/L),NO2--N的去除率随呈现先增加后减少的趋势。部分碱基基因突变、表达载体及宿主细菌对NO2--N的去除影响可忽略不计。(2).在nirS基因重组工程菌/NO2-体系中,nirS基因重组工程菌能快速到达稳定期。NO2--N初始浓度从10mg/L增加至65mg/L时,细菌基本保持在稳定期。随着nirS基因重组工程菌传代数的增加,其脱氮效率保持在70%左右。由于传代过程中基因突变等因素的影响,nirS基因重组工程菌脱氮性能能稳定传至第七代。由于Fe(II)是细菌生长必备的微量元素,添加微量的Fe(II)可促进nirS基因重组工程菌脱氮过程的进行。(3).在HZO基因重组工程菌/N2H4体系中,在N2H4-N初始浓度为85mg/L和工程菌投加量20m L条件下,37℃、200rpm振荡反应1600min,N2H4-N去除率达到78%,且HZO基因重组工程菌在脱氮过程中表现出良好的传代性能:传至第六代N2H4-N去除率保持在70%。(4).HZO基因重组工程菌重组蛋白表达实验表明,在20℃、过夜和37℃、5h诱导条件下,重组蛋白成功表达,且具有一定活性。利用SDS-PAGE电泳测定蛋白纯度达90%,采用SK3071非干扰型蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度为0.58mg/m L。(5).采用共沉淀法制备绿锈GRI-CO32-,利用XRD、FTIR及XPS等技术对反应前后固体物质表征。GRI-CO32-还原NO2-的实验结果表明,在NO2--N初始浓度150mg/L、投加150m L GRI-CO32-悬浊液和初始pH 9.5实验条件下,在540min内,NO2--N和TN去除率分别达到97.1%和90%。伴随着氧化产物Fe3O4的形成,N2O(71.34%)和N2(14.06%)逐渐产生,少量的NH4+(4.68%)和NO3-(2.97%)也逐渐形成,且Fe3O4的投加促进GRI-CO32-的还原能力,有利于Fe3O4的循环再利用。(6).在GRI-CO32-/NO2-体系中,通过计算方程式Eh和调控体系Eh变化发现,还原产物的形成顺序为N2O、N2和NH4+,且还原产物的形成种类随Eh变化而改变。相比NO2--N初始浓度,初始pH对Eh的调控和还原产物的形成起决定性作用。通过建立动力学模拟发现,GRI-CO32-还原NO2--N符合一级反应动力学。