【摘 要】
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目的探索长链非编码RNA（Long non-coding RNA,lncRNA）SLCO4A1-AS1对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其可能介导的信号通路。方法1使用干扰RNA瞬时转染技术构建抑制组模型,转染无义序列作为抑制对照组,根据不同的抑制靶点将抑制组分为,抑制组（1）、抑制组（2）及抑制组（3）,并利用实时荧光定量PCR技术（q RT-PCR）筛出最佳的一组进行下一步实验;利用质粒转染过表达的
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目的探索长链非编码RNA（Long non-coding RNA,lncRNA）SLCO4A1-AS1对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其可能介导的信号通路。方法1使用干扰RNA瞬时转染技术构建抑制组模型,转染无义序列作为抑制对照组,根据不同的抑制靶点将抑制组分为,抑制组（1）、抑制组（2）及抑制组（3）,并利用实时荧光定量PCR技术（q RT-PCR）筛出最佳的一组进行下一步实验;利用质粒转染过表达的SLCO4A1-AS1构建过表达组模型,转染空载质粒作为过表达对照组;不做任何处理的细胞作为空白组。2利用q RT-PCR分别检测空白组、抑制组、抑制对照组、过表达组、过表达对照组在人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1中SLCO4A1-AS1的表达量,验证细胞模型是否构建成功。3体外细胞功能试验:利用CCK8检测人甲状腺乳头状癌细胞增殖能力、划痕实验检测细胞的迁移能力、Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力。4蛋白质印记实验（Western blot）检测Wnt/β-catenin通路中β-catenin蛋白和AXIN2蛋白的表达情况。结果1通过q RT-PCR筛选出抑制组（2）抑制效果最佳,保留抑制组（2）,并将其作为抑制组进行以下实验。q RT-PCR检测SLCO4A1-AS1的表达量结果:与空白组及抑制对照组对比,统计学分析结果显示,差异有统计学意义（P＜0.05）;过表达组的SLCO4A1-AS1表达量与空白组及空白对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;空白组、抑制组、过表达组之间SLCO4A1-AS1的表达量差异也具有统计学意义（P＜0.05）。2敲低SLCO4A1-AS1后细胞的增值能力、迁移能力及侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义（P＜0.05）;过表达SLCO4A1-AS1后细胞的增值能力、迁移能力及侵袭能力明显增强,差异有统计学意义（P＜0.05）。3Western blot显示,敲低SLCO4A1-AS1后β-catenin蛋白和AXIN2蛋白表达量均降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;过表达SLCO4A1-AS1,β-catenin蛋白和AXIN2蛋白表达量则明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论1实时荧光定量PCR法检测抑制、过表达的人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞稳定细胞模型构建成功,并筛选出抑制效果最佳的抑制组（2）作为后续实验的抑制组。2 SLCO4A1-AS1在人甲状腺乳头状细胞癌中明显起到促进细胞的增殖、迁移及侵袭能力。3 lncRNA SLCO4A1-AS1可能通过Wnt/β-catenin通路参与调解甲状腺乳头状细胞癌的发生发展。图 8 幅;表 12 个;参 142 篇。
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