目的:探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、培养和纯化方法,并观察骨髓间充质干细胞移植对脊髓横断性损伤大鼠运动功能的修复作用。方法:无菌条件下取Sprague-Dawley大鼠股骨和胫骨骨髓细胞作原代培养。筛选易贴壁但贴壁不牢的细胞进行传代培养。免疫细胞化学染色法鉴定MSCs CD54和CD90的表达情况。将32只成年Sprague-Dawley大鼠随机分为移植组(n=16)和对照组(n=16),均进行脊髓横断损伤。伤后即刻,移植组于伤处移植大鼠MSCs(其中2只注射BrdU标记的MSCs,供术后1周取材),而对照组仅注射等量PBS。分别于移植后1-8周用BBB评分观测大鼠的运动功能,并于移植后1周免疫组织化学染色法观察BrdU标记的MSCs在脊髓损伤处的存活情况,移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果:免疫细胞化学染色检测传代培养的MSCs标志物表达:CD54(+),CD90(+)。术后实验组大鼠后肢运动功能比对照组恢复明显,术后第1-8周BBB评分均髙于对照组。术后1周石蜡切片,免疫组织化学染色结果显示在实验组大鼠脊髓远端检测到BrdU阳性细胞,术后4周脊髓损伤处发现有神经纤维。结论:通过损伤后即刻局部注射的方式将MSCs移植至脊髓损伤区,MSCs可在损伤区存活。存活的MSCs可以分化成神经元,在损伤局部形成神经元通路,使损伤脊髓的远端和近端建立联系,从而促进脊髓神经纤维传导功能恢复。并可能促进损伤的神经轴突的再生。