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研究背景:乳腺癌已经成为全球女性恶性肿瘤发病率及病死率居于首位的恶性肿瘤,三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）作为其中的一个亚型,具有高组织病理学分级,高远处转移率以及低存活率的特征。三阴性乳腺癌的病理学特征为ER（-）、PR（-）、HER-2（-）。由于三阴性乳腺癌缺乏相应的激素受体和HER-2表达,所以无针对性的靶向药物可以使用,治疗方案仍是医学界的难题。目前针对该病的药物研究除化疗相关药物外,其余药物研究主要集中在通路靶向抑制剂和免疫疗法。槐耳颗粒是以槐耳菌质为主要成分的一种抗癌药物,适用于正气虚弱,瘀血阻滞的患者,常作为胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等恶性肿瘤放化疗或手术治疗方案的辅助用药。目前该药用于治疗乳腺癌的作用机制尚未明确,临床效果有待更多的数据评估。PI3K/Akt/mTOR信号通路广泛存在于细胞中,在肿瘤细胞的增值、凋亡中有重要作用,该通路的抑制剂应用于肿瘤疾病的治疗仍是一个研究热点方向。研究目的:针对科研热点、临床难点的三阴性乳腺癌的治疗,探究槐耳颗粒是否可以应用于三阴性乳腺癌的治疗。以MDA-MB-231细胞为实验对象,探究槐耳颗粒抑制肿瘤细胞的分子作用机制,为临床上从P13K/Akt/mTOR通路抑制剂以及槐耳颗粒治疗三阴性乳腺癌提供实验依据及指导。研究方法:使用MDA-MB-231细胞做体外实验,通过设置不同浓度梯度的槐耳颗粒组（0、2、4、8 mg/ml）,观察各组人MDA-MB-231细胞在细胞形态、增殖、凋亡以及PI3K、Akt、mTOR的表达的差异,从而探讨槐耳颗粒治疗三阴性乳腺癌的分子机制。本研究的实验方法包括通过CCK-8实验来检测MDA-MB-231细胞的增殖情况,检测不同浓度的槐耳颗粒分别作用于MDA-MB-231细胞和MCF-1OA细胞24小时、48小时和72小时后各组的细胞活性,对比同样时间下不同浓度槐耳颗粒对两种细胞的活性影响以及同样浓度下槐耳颗粒作用于细胞不同时间对两种细胞的活性影响。通过Tunel实验检测MDA-MB-231细胞的凋亡情况,使用不同浓度的槐耳颗粒作用于MDA-MB-231细胞48小时后进行Tunel实验。通过免疫蛋白印迹法来检测不同浓度作用48小时后的MDA-MB-231细胞中PI3K、Akt、mTOR蛋白的表达量。研究结果:槐耳颗粒对MDA-MB-231细胞的细胞活性起到抑制作用,该抑制作用呈时间和浓度依赖;槐耳颗粒可以促进MDA-MB-231细胞的凋亡,呈浓度依赖,无时间依赖;槐耳颗粒可以抑制MDA-MB-231细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路,可以抑制PI3K p85、Akt、mTOR的表达,对PI3Kp85、AKT表达的抑制有浓度依赖,对mTOR表达的抑制没有浓度依赖。结论及意义:槐耳颗粒对MDA-MB-231细胞的活性有抑制作用,可以通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路来促进MDA-MB-231细胞的凋亡,进而抑制MDA-MB-231细胞的活化。该研究为槐耳颗粒临床应用于三阴性乳腺癌提供了实验依据。