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本课题对青海省海西州都兰县枸杞叶多糖的提取、分离纯化以及体外α-糖苷酶抑制活性进行了系统的研究。主要研究成果如下:
(1)对枸杞叶多糖的热水浸提法、超声提取法两种提取工艺进行了对比研究,并优化了提取工艺参数。热水浸提法优化工艺条件为:提取温度72.9℃,时间132min,料液比1:47.2(w/w),在此优化条件下,多糖纯度为7.24%;超声提取法优化工艺条件为:提取功率74W,温度56.3℃,时间40.25min,在此优化工艺条件下,多糖纯度为7.06%。上述数据表明超声提取法具有提取温度低、时间短的优点,但超声法在提取物多糖纯度上略逊于热水浸提法。
(2)多糖脱蛋白工艺:通过对AB-8、D101和D3520三种大孔树脂脱蛋白效果的对比研究,得到了一条大孔树脂吸附法脱除枸杞叶多糖中蛋白杂质的工艺路线。动态吸附和解吸试验表明:D3520是脱除枸杞叶多糖蛋白的理想树脂。蛋白质脱除的优化条件为:多糖样品的上样浓度为5mg/mL,上样量为2倍柱体积,流速为1.5倍柱体积/h。在此工艺条件下,多糖保留率为98.14%,蛋白脱除率为71.06%。
(3)脱蛋白后的枸杞叶多糖经DEAE-52柱和Sephadex G-50柱分离,共得到了BP1-1、BP1-2和BP1-3三个多糖分级组分。经Sephadex G-50验证BP1-1和BP1-3为单一多糖级分,接着对上述三个多糖级分进行了α-糖苷酶抑制活性的研究,结果表明三个多糖组分均有一定的α-糖菅酶抑制活性,但是只有BP1-3具有较高的α-糖苷酶抑制活性(IC50为0.51mg/mL),且抑制效果对抑制剂浓度具有浓度依赖性。
本研究结果为枸杞叶资源的综合利用提供了一条新途径,对同类研究具有一定的参考和借鉴作用。