G蛋白β亚基AGB1调控拟南芥耐盐性的作用机制

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G蛋白(GTP结合蛋白)异源三聚体复合物通过GPCR(G蛋白偶联受体)将胞外信号传递给α、β和γ亚基,进而传递给各亚基下游的效应器,G蛋白复合体在细胞信号转导过程中发挥重要作用。目前,已有文献报道G蛋白复合体在植物中参与发育、激素响应、病原防卫反应和胁迫响应等各种重要的信号传导过程,但目前关于G蛋白参与盐胁迫响应过程的研究还未见报道。本研究比较野生型拟南芥(Col-0)和G蛋白β亚基(AGB1)突变体agb1-2在高盐胁迫下的表型、生理生化反应以及胁迫相关基因表达情况,解析AGB1调控植物耐盐性的作用机制。研究结果如下:1.表达谱分析结果表明,AGB1在冷和热胁迫条件下下调表达,在高盐胁迫条件下上调表达;2.在高盐胁迫条件下,相对于Col-0,agb1-2突变体对盐更加敏感,agb1-2的幼苗绿化率、植株鲜重、萌发率和存活率均降低,agb1-2的主根长更短;3.生理生化指标分析结果表明,在高盐处理后,agb1-2突变体中叶绿素含量、脯氨酸含量、POD(过氧化物酶)活力、Na+含量、K+含量较Col-0降低,而丙二醛含量和Na+/K+浓度比较Col-0升高,表明AGB1基因正向调节植物的耐盐性;4.胁迫相关基因表达分析表明,盐处理后,在突变体agb1-2中部分MAPK蛋白激酶(丝裂原活化蛋白激酶)基因,ABA响应、胁迫响应、离子通道、脯氨酸合成和氧化胁迫等相关基因的表达量均低于Col-0,这些下游基因控制的生理生化过程与3中测定的生理过程相符,推测这些基因处于AGB1基因的下游,通过控制3中测定的生理生化过程影响拟南芥的耐盐性;5.为进一步揭示AGB1的分子调控机制,利用酵母核系统筛选AGB1的互作蛋白,然后利用酵母互作实验、双分子荧光互补实验和蛋白体外pull-down实验验证AGB1与MAPK1蛋白互作,MAPK1可能参与AGB1调控植物的耐盐反应,具体调控机制有待进一步研究。综上所述,本研究对AGB1突变体盐胁迫的表型及生理生化指标进行鉴定,第一次确定AGB1正向调控植物的耐盐性;通过对AGB1可能的下游基因表达及互作蛋白进行鉴定,初步揭示AGB1调控植物耐盐性的分子机制。这些研究为进一步剖析整个G蛋白复合体调控植物逆境反应的分子机制创造条件。
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