【摘 要】
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锌在体内参与多种代谢过程,如神经传递,酶的催化和细胞凋亡等活动。人体缺锌后,会造成代谢功能紊乱,进而导致多种神经性疾病的产生,如alzheimer和Parkinson等。土壤中锌含量
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锌在体内参与多种代谢过程,如神经传递,酶的催化和细胞凋亡等活动。人体缺锌后,会造成代谢功能紊乱,进而导致多种神经性疾病的产生,如alzheimer和Parkinson等。土壤中锌含量的多少对植物能否正常生长至关重要。在工业方面,锌的生产和使用会产生大量的含锌废水,对人体和环境造成一定的危害。本研究利用生物学手段在本实验室之前构建的CFP-PML-YFP的基础上,又探索了一系列荧光探针去检测土壤或废水中的Zn2+含量。利用FRET技术结合锌指蛋白PML及其相关结构,采取定点突变及酶切连接的方式构建了Zifl-、Zif2、 CFP-PML-PML-YFP、CFP-RBB-YFP及CFP-PML、PML-YFP。其中,突变的单锌指的Zifl和Zif2对Zn2+的检测上限是10μM, CFP-PML-PML-YFP对Zn2+的检测上限是4μM, CFP-RBB-YFP对Zn2+的检测上限可高至1mM, CFP-PML、 YFP-PML对Zn2+的检测上限是80μM,检测精细程度是ZiflZif2>CFP-PML-PML-YFP>CFP-PML、YFP-PML>CFP-RBB-YFP。并对其分析比较,得到了能够对生命体和环境中的Zn2+进行定量的、特异的、高效的并且不同检测上限的荧光探针。
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