固定化酶法合成氨基葡萄糖-6-磷酸的研究

来源 :浙江工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wywtqywqy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
氨基葡萄糖-6-磷酸酯的生产制备方法主要有化学合成法、发酵法和酶促转化法三种。酶法合成方面,早期以6-磷酸果糖、谷氨酰胺及三磷酸腺苷为原料在氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶催化下合成,另一种酶促转化法以氨基葡萄糖与ATP为原料,在已糖激酶作用下直接合成氨基葡萄糖-6-磷酸,由于酶源来源方便,三磷酸腺苷价格下降,副产物ADP回收利用及固定化酶的使用,该法工业化的可能性加大。本实验从土壤中分离筛选得到一株氨基葡萄糖激酶高产菌,并进行了培养基与培养条件的优化。在培养基优化过程中,着重考察了培养基中的碳源:氨基葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇、葡萄糖;氮源:玉米浆、牛肉膏、酵母浸膏、蛋白胨、硫酸铵;无机离子:CaCl2·2H20、 MgS04·7H2O、FeS04·7H2O、CuSO4·5H2O、MnS04-5H20对酶发酵的影响。选择确定最佳碳源为氨基葡萄糖,最佳氮源为玉米浆,最佳无机盐为MgCl2-12H20。经正交实验确定最佳培养基组成为:氨基葡萄糖3%、玉米浆0.5%、MgCl2·12H200.03%;最佳发酵条件为:搅拌转速600rpm,发酵温度为30℃,通气量为5L/min,接种量为2%酶活力产量达到了145U/ml发酵液(以氨基葡萄糖为底物计)。本实验还考察了细胞破碎的三种方法,其中以SDS(十二烷基硫酸钠)法最好,最佳节条件为SDS浓度为为0.1%,EDTA浓度为3mmo1/L提取时间4小时,经超滤和DEAE纤维素层析后可纯化430倍,该酶,在5%葡萄糖存在条件经聚丙烯酰胺固定化,酶活力回收率可达45%,该固定化酶重复使用10次后酶活力仍保留50%。在酶促合成氨基葡萄糖-6-磷酸过程中,考察了反应温度及三种反应物的浓度对反应收率的影响,最佳条件为氨基葡萄糖2mmol, ATP1.8mmol,MgCl21.5mmol转化率最高可达90%,纯度98%以上,同时副产物中没有ATP,有利于ADP的进一步分离纯化回收利用,降低生产成本。
其他文献
近年来,随着一系列企业社会责任缺失事件的爆发以及相关社会责任政策的陆续出台,学术界开始研究履行社会责任的经济后果,但是现有研究更多的集中在履行社会责任对企业价值、企业绩效的影响。由于我国目前资本市场的发展尚不成熟,信息不对称及代理问题引发的非效率投资现象普遍存在。影响企业投资行为的因素众多,但是目前研究社会责任表现对投资效率影响的文献较少,本文试图研究二者之间的关系。考虑到社会责任表现除了可能直接
金刚石切割线是一种重要的高精度切割的基础耗材,它是通过在金属基材线上附着金刚石颗粒后得到的,基材线径一般为几十个微米,金刚石颗粒大小一般为几个微米。由于尺寸小,生产环节复杂,其质量控制一般采用人工抽检的方式来进行,但是,人工检测抽检存在误检率高,检测精度低等问题,且做不到全检,其质量把控能力一般。本文提出了基于机器视觉的检测方法,构建金刚石切割线的检测系统,解决金刚石切割线的检测问题。金刚石切割线
伴随电子信息与通信技术的发展,金属软磁薄膜的适用范围越来越广。因为电磁器件不断地向高频化和小型化的方向发展,金属软磁薄膜需要在GHz的频段下有高磁导率、高的饱和磁化
目的:探讨腰1椎体爆裂性骨折影像学形态改变及圆锥位置高低与神经功能损伤情况之间的相关性,为临床诊断与治疗腰1椎体爆裂骨折提供一定的理论依据。方法:回顾性分析2015年6月至2019年6月因急性腰1椎体爆裂性骨折住院治疗,且满足纳入、排除标准的61例患者的相关临床资料。测量椎体前缘高度(A)、椎体后缘高度(P)、椎体局部后凸角(local kyphosis,LK)、椎体平移距离(translatio
社会参与是社区矫正的本质特征之一。《社区矫正法》从参与主体、参与客体和参与方式等方面建构了一个比较完善的社会力量参与社区矫正的制度框架。对社区矫正社会参与问题的研究,需要根据法律规定并结合相关实践情况,从社区矫正中社会参与问题的法制背景、制度背景和经验背景出发,从学理和实践两个层面进行。社会参与社区矫正中的问题可概括为:(1)社会参与的非规范化,主要表现为法律规范贯彻的不足和运作机制的不健全;(2
本学位论文是一篇汉译英翻译实践报告,由汉译英翻译实践和相应的实践报告组成。翻译实践内容选自漓江出版社2011年7月出版的《桂林抗战文化史》,作者魏华龄。该源文本属于社会类、文化类历史文本,信息丰富,语言平实。该书详细记录了反映桂林抗战文化盛况的史料,填补了相关空白。该书叙述的革命史实丰富,内容系统而全面,见解深刻,兼具故事性和趣味性。目前尚未发现对应的英译本。《桂林抗战文化史》记述了抗日战争时期桂
ATP是生物细胞生命活动能量的直接来源,临床上广泛用作细胞激活剂,对肝炎、心脏病、肌肉萎缩、脑溢血后遗症等有良好疗效,近期ATP促进细胞坏死和凋亡、抗癌等作用受到关注,有
本论文目的是利用脂肪酶催化不对称转酯化反应拆分外消旋帕罗西汀中间体,从而获得光学纯帕罗西汀中间体。论文建立了帕罗西汀中间体液相色谱分析方法,得到液相色谱检测的工作
在各国公司法中公司资本制度的地位都十分重要,中俄两国公司资本制度几经风雨,经历了多次变革。我国公司资本制度的变迁是一个从严格到缓和的总过程,俄罗斯公司资本制度经历沙俄时期、苏联时期、苏联解体的三个阶段。我国现行公司法在立法上采用的是单行法模式,把各种公司的法律问题全面、系统地规定在一起,俄罗斯现行公司法立法模式为民商合一,此外由两部单行公司法进行补充。我国公司资本制度属于法定资本制,俄罗斯公司资本
本实验室前期从病害白术茎秆中分离得到了一株沙雷氏菌FS14,研究发现,该菌株能分泌耐高温的DNA酶和蛋白水解酶。这是首次发现沙雷氏菌能分泌耐高温的DNA酶和蛋白水解酶。本试