两种虹彩病毒ISKNV和TFV的细胞感染研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:godchrist
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
传染性脾肾坏死病毒(infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)是重要养殖鱼类鳜鱼(Siniperca chuami)暴发性流行病的病原,为虹彩病毒科(Iridoviridae),细胞肿大病毒属(Megalocytivirus)的代表种。虎纹蛙病毒(tigerfrog virus,TFV)是使养殖虎纹蛙蝌蚪(Rana tigrina rugulosa)和中华鳖(Trionyxsinensis)发病致死的主要病原,属于虹彩病毒科,蛙病毒属(Ranavirus)。 本研究用ISKNV对本实验室现有鱼类细胞系进行了敏感细胞系筛查,结果没有找到可感染ISKNV的细胞系。基于此,开展了鳜鱼多种组织及仔鱼的原代细胞培养工作。其中鳜鱼心脏和脑的原代细胞在传代至9代左右时无法继续维持;鳍条细胞(MF)可传代至13代,无法继续培养;肾细胞(MK)生长情况良好,可传代培养至13代左右;鳜鱼仔鱼细胞(M-Fry)在传至30余代后仍保持良好状态,存活一年多,营养条件及培养环境基本稳定,有望建立成熟细胞系。通过ISKNV攻毒实验,发现M-Fry、MK和MF在感染ISKNV后均可以出现细胞病理变化(cytopathognic effect,CPE),但并非典型的病毒空斑现象。逆转录PCR结果证实该病毒确实在这三种细胞中发生转录。通过电子显微镜观察只在M-Fry细胞内发现有二十面体结构的ISKNV病毒粒子。利用对ISKNV敏感的M-Fry细胞,进行病毒部分基因的转录分析,获得ISKNV部分基因表达时相的同时,也证实M-Fry细胞可作为ISKNV全基因组转录时相分析的有力工具,为ISKNV全部ORF的划分、聚类提供更多实验依据。 TFV病毒已知其有多种鱼类敏感细胞系。由于斑马鱼胚胎细胞系ZF4的建立使其成为体外及细胞水平研究的有力工具,本论文进行了TFV对ZF4的感染实验。研究发现ZF4细胞在感染TFV之后会出现典型的CPE,并且通过透射电镜观察到在ZF4细胞内晶格状整齐排列的TFV病毒粒子以及通过出芽方式正在释放中的病毒;另外逆转录PCR及免疫荧光实验证实该病毒确实在ZF4细胞中发生转录及蛋白合成。本研究为今后将模式动物-斑马鱼引入鱼类虹彩病毒的研究中奠定了基础。
其他文献
石斑鱼(Epinephelus tauvina)是重要的海水养殖鱼类,具有较高经济价值,已经成为我国重要的海水鱼类养殖品种。在世界许多地区,由病毒如虹彩病毒引起的疾病已呈明显上升趋势,致使
在贫瘠的红壤中模拟单一的三浓度梯度的重金属Cd、Pb和Zn的污染,研究在不同的重金属污染逆境条件下,丛枝菌根真菌的侵染对水稻生长,以及吸收、分配重金属元素的影响。试验结果表
ecp是从野生型黑腹果蝇胚胎cDNA文库中筛选并克隆得到的一个新基因,生物信息学分析及本实验室蔗糖密度梯度离心分离核糖体结合Western blowing分析表明ECP可以和核糖体的40S小
人B组轮状病毒(group B rotavirus,GBRV)由我国洪涛1983年首次发现,主要感染成年人,在我国多次引起大规模的暴发性腹泻的大流行。人群B组轮状病毒抗体水平调查结果显示,其他国家
鱼类的生长、发育和生殖受体内各种内分泌激素的调控,鱼类脑垂体是鱼类重要的内分泌器官,脑垂体在这些激素的分泌活动中起着重要的作用。 人工注射催产素的目的是在人工条件
本文探讨了五味子对半乳糖致衰小鼠脑神经细胞线粒体DNA缺失及能量代谢影响。本研究以D—半乳糖致衰老小鼠模型为研究对象,选用五味子水提液、五味子醇提液、五味子纳米微粒水
虎纹蛙病毒(tiger frog virus,TFV)是虹彩病毒的一种,也是养殖虎纹蛙蝌蚪和中华鳖发病致死的主要病原之一,本实验在已完成虎纹蛙病毒的全基因组测序的基础上,对其ORF10和ORF80蛋
目的:本实验研究可以进一步证明上丘-小脑-上丘的控制眼球运动神经回路的存在。并再次从形态学上证明小脑内侧核-上丘投射神经元末梢在上丘内的分布。本研究可进一步搞清小脑
将采集自各地的朽木和碱性土壤进行菌种筛选,从中得到一株丝状真菌FG-2。对该菌株粗酶液的基本性质进行测定,发现其为耐碱性纤维素酶产生菌,葡聚糖内切酶的最适作用pH值为7.2左
本研究以俄罗斯杨(Populus russkii)、胡杨(Populus euphratica)、新疆杨(Populus bolleca)3种杨树为材料,用土壤盆栽进行培养。通过硼浓度梯度实验比较了3个杨树种的耐高硼