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黄芪多糖是从中药黄芪中提取出来的多聚糖,是黄芪中含量最多,免疫活性较强的天然成分,研究证明,黄芪多糖具有免疫调节功能及药理功效,还具有来源广泛、细胞毒性低、增强免疫效果等特点,可以作为疫苗佐剂进行实验研究。白色念珠菌是广泛寄居在宿主体内的一种条件致病真菌,目前对于白色念珠菌感染的治疗主要是通过一些抗真菌的药物,但系统性白色念珠菌感染,服用抗真菌药物后仍有70%的死亡率,因此选择良好的疫苗激发机体的适应性和固有性免疫将成为研制安全有效的白色念珠菌疫苗的重要策略。研究发现,白色念珠菌热休克蛋白90(Hsp90)是白色念珠菌的一种免疫优势抗原,是免疫应答的主要靶位,能够诱导机体产生保护性抗体,而其中的表位C是一种保守表位,能够与所有病人的血清起反应,因此可以将其作为白色念珠菌疫苗的候选抗原。本实验室表达了含有白色念珠菌热休克蛋白90表位C的重组蛋白(rP-HSP90C),可以作为疫苗,但是重组疫苗免疫原性较差,需要一种安全有效的佐剂来增强其免疫效果。本论文以黄芪多糖(APS)作为疫苗佐剂与rP-HSP90C共同免疫ICR小鼠,皮下注射免疫两次,末次免疫后的第14天,对免疫小鼠进行眼球取血,收集血清进行后续实验,来研究黄芪多糖的免疫增强作用。Western Blot实验检测免疫小鼠抗血清中抗体的特异性;ELISA实验检测抗血清中特异性抗体IgG、IgG1及IgG2b的抗体滴度;ELISA试剂盒检测抗血清中IL-2、IL-12、IL-4、IL-10的含量;迟发型超敏反应实验;检测肾脏的真菌负荷量以及分析肾组织切片的病理变化研究APS对rP-HSP90C抗系统性白色念珠菌免疫保护作用的影响。实验结果表明,APS与rP-HSP90C共同免疫小鼠后,其血清中特异性抗体IgG、IgG1及IgG2b滴度及IL-2、IL-12、IL-4、IL-10含量明显高于rP-HSP90C组;增强了迟发型超敏反应;免疫保护实验结果显示,APS与rP-HSP90C共同免疫组小鼠肾组织匀浆培养得到的白色念珠菌菌落数显著少于rP-HSP90C组,肾脏的受损程度明显减弱。实验结果有利地证明了APS作为rP-HSP90C疫苗的佐剂显著增强了Th1型和Th2型免疫应答,增强了rP-HSP90C疫苗抗系统性白色念珠菌感染的能力,为APS在疫苗佐剂领域中的应用奠定了实验基础,也为白色念珠菌感染的疫苗的研制奠定了实验基础。