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1.目的:观察参地颗粒对膜性肾病（Membranous Nephropathy,MN）脾肾亏虚证患者的临床疗效及尿液外泌体mi R-193a和足细胞损伤的影响。2.方法:选择60例MN脾肾亏虚证患者为研究对象,随机分组为参地颗粒组及缬沙坦组各30例。所有病例予以西医基础治疗,参地颗粒组与缬沙坦组在西医治疗的基础上分别加用中药参地颗粒和西药缬沙坦胶囊,持续3个疗程,4周为一疗程,共计12周。试验过程中共脱落10例,最后共纳入50例（参地颗粒组24例,缬沙坦组26例）,并筛选20例健康人纳入正常组。检测用药两组每个疗程前后尿ACR、24h Upro含量;检测各组治疗前后尿Podocin、Nephrin、WT-1蛋白含量及尿外泌体mi R-193a表达情况。3.结果3.1中医证候疗效评价:参地颗粒组与缬沙坦组总有效率分别为83.33%和42.31%,且两组间差异显著（P＜0.05）。3.2临床疾病疗效评价:参地颗粒组与缬沙坦组总有效率分别为79.17%和50.00%,且两组间差异显著（P＜0.05）。3.3中医证候积分值评价:参地颗粒组与缬沙坦组在治疗前无显著差异（P＞0.05）;治疗第12周时,参地颗粒组较治疗前下降显著（P＜0.05）,而同期的缬沙坦组较治疗前无显著降低（P＞0.05）,两组之间比较有显著性差异（P＜0.05）。3.4各组24h-Upro、尿ACR比较（ELISA法）:治疗前,参地颗粒组与缬沙坦组24h-Upro、尿ACR比较无显著差异（P＞0.05）;治疗第8周和第12周后,参地颗粒组与缬沙坦组24h-Upro、尿ACR较治疗前均显著降低（P＜0.05）;第8周后,参地颗粒组与缬沙坦组24h-Upro、尿ACR比较显著差异（P＞0.05）;第12周时,参地颗粒组较缬沙坦组24h-Upro、尿ACR降低更为显著（P＜0.05）。3.5各组尿Podocin、Nephrin、WT-1蛋白含量比较（ELISA法）:治疗前,参地颗粒组与缬沙坦组尿沉渣中各指标较正常组均显著增多（P＜0.05）,而参地颗粒组与缬沙坦组治疗前各指标无显著差异（P＞0.05）。第12周时,参地颗粒组与缬沙坦组尿中Nephrin、Podocin、WT-1蛋白含量较治疗前均显著减少（P＜0.05）,且参地颗粒组尿Nephrin、WT-1蛋白含量下降程度较缬沙坦组更为显著（P＜0.05）。3.6各组尿外泌体mi R-193a相对表达量比较（q RT-PCR法）:治疗前,参地颗粒组与缬沙坦组较正常组显著升高（P＜0.05）,而参地颗粒组与缬沙坦组比较无显著差异（P＞0.05）;第12周时,参地颗粒组较治疗前显著降低（P＜0.05）,而缬沙坦组治疗前后无显著差异（P＞0.05）。3.7安全指标检测:治疗12周期间,各组安全指标在正常范围内波动。4.结论4.1参地颗粒能显著减轻MN脾肾亏虚证患者临床症状,降低尿蛋白排泄率,提高患者临床疾病疗效和中医证候疗效,并且安全性良好。4.2 MN脾肾亏虚证患者出现足细胞损伤和尿外泌体mi R-193a表达增加。4.3参地颗粒能够降低MN脾肾亏虚证患者尿液中Podocin、Nephrin、WT-1蛋白的排泄,并且能够下调尿外泌体mi R-193a的表达,进而减轻肾小球足细胞损伤程度。1.目的:观察参地颗粒对阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）诱导的肾炎大鼠肾组织中mi RNA-193a和足细胞损伤的影响。2.方法:选取40只2月龄体重约在180-220g之间的SD大鼠,随机分为正常组、模型组、参地颗粒组、缬沙坦组,共4组。除正常组外,其余各组均予以尾静脉注射C-BSA诱导膜性肾病模型[25],4周后检测尿蛋白阳性提示造模成功。所有大鼠在造模结束后第1日灌胃用药,参地颗粒组与缬沙坦组分别予以等容积的4.0g/（kg·d）参地颗粒水溶液及20mg/（kg·d）缬沙坦胶囊混悬液灌胃,剩余两组灌胃相同体积的生理盐水。每天1次,每次3ml,疗程8周。留取大鼠尿液、动脉血以及肾脏组织,ELISA检测大鼠尿沉渣中尿白蛋白（U-ALB）、尿肌酐（U-Cr）、尿白蛋白/尿肌酐（UACR）、血肌酐（SCR）、尿素氮（BUN）水平。Western blot法检测肾脏组织中Nephrin、Podocin、WT-1、α-SMA蛋白表达情况;免疫组化法检测肾组织凋亡分子Bcl-2、Bax及足细胞标志分子WT-1的表达水平;q RT-PCR检测肾组织WT-1 m RNA及mi R-193a的表达量;透射电镜观察足细胞形态及结构改变。3结果3.1各组大鼠一般情况比较:正常组在实验全过程中精神状态良好,动作反应灵敏,皮毛光滑致密,饮食摄入正常。模型组精神和活动能力低下,嗜睡,毛色欠光泽伴有脱毛,摄入量减少,大便稀薄;参地颗粒组与缬沙坦组大鼠精神状态良好、皮毛较光滑致密,反应灵敏,饮食量增加,大便稀薄症状改善明显。3.2各组Scr和BUN比较（ELISA法）:模型组大鼠Scr、BUN较正常组显著升高（P＜0.05）。参地颗粒组与缬沙坦组大鼠Scr、BUN较模型组显著降低（P＜0.05）;参地颗粒组大鼠的Scr、BUN较缬沙坦组降低更为显著（P＜0.05）。3.3各组尿U-ALB、U-Cr、UACR比较（ELISA法）:模型组大鼠尿U-ALB、U-Cr、UACR含量较正常组升高明显（P＜0.05）。参地颗粒组与缬沙坦组大鼠U-ALB、U-Cr、UACR含量较模型组均显著降低（P＜0.05）;与缬沙坦组比较,参地颗粒组U-ALB显著下降（P＜0.05）,而U-Cr、UACR含量无显著性差异（P＞0.05）。3.4各组肾脏组织中Nephrin、Podocin、WT-1、α-SMA蛋白表达情况（Western blot法）:模型组与正常组比较,大鼠肾组织中Nephrin、Podocin、WT-1蛋白表达均显著减少,而α-SMA表达显著上升（P＜0.05）。参地颗粒组与模型组比较,大鼠肾组织中Nephrin、Podocin、WT-1蛋白表达显著增加,α-SMA表达显著下降（P＜0.05）;缬沙坦组与模型组比较,肾组织中WT-1蛋白表达显著增加,α-SMA表达显著下降（P＜0.05）,而Nephrin、Podocin蛋白表达亦有增加,但是差异不够显著（P＞0.05）;且参地颗粒组的Nephrin、Podocin、WT-1、α-SMA蛋白表达量均显著优于缬沙坦组（P＜0.05）。3.5各组大鼠肾组织凋亡分子Bcl-2、Bax及足细胞标志分子WT-1的表达水平（免疫组化法）:正常组肾小球内Bcl-2及WT-1呈现阳性染色,与正常组比较,其余各组染色水平均不同程度减少;模型组Bcl-2及WT-1染色水平最低,参地颗粒组及缬沙坦组Bcl-2及WT-1染色水平高于模型组;模型组肾小球内可见Bax阳性染色,其阳性染色水平明显高于其余各组,其中正常组最少,参地颗粒组与缬沙坦组均有不同程度降低。半定量分析显示:模型组大鼠肾组织Bax含量较正常组升高显著（P＜0.05）;参地颗粒组与缬沙坦组大鼠肾组织Bax含量较模型组均显著降低（P＜0.05）;模型组大鼠肾小球中Bcl-2及WT-1表达量较正常组显著降低（P＜0.05）;参地颗粒组与缬沙坦组Bcl-2及WT-1表达较模型组均显著升高（P＜0.05）。3.6肾组织中WT-1及mi RNA-193a m RNA表达（q RT-PCR法）:模型组较正常组,肾组织中WT-1 m RNA表达显著下降,而mi RNA-193a m RNA表达则显著升高（P＜0.05）;参地颗粒组与缬沙坦组肾组织中WT-1 m RNA表达较模型组显著升高,而mi RNA-193a m RNA表达则明显下降（P＜0.05）;且参地颗粒组肾组织中WT-1及mi RNA-193a m RNA表达变化均显著优于缬沙坦组（P＜0.05）。3.7透射电镜观察足细胞形态及结构改变:正常组大鼠肾小球结构和形态未见明显改变。模型组大鼠的足突排列不规整,部分足突融合、消失,肾小球基底膜显著增厚,肾小球上皮下可见弥漫性电子致密物沉积。与模型组比较,参地颗粒组及缬沙坦组的肾小球基底膜增厚、足突融合、电子致密物沉积等病理损伤均有所改善。4.结论4.1 C-BSA肾炎大鼠出现足细胞损伤和肾组织中mi RNA-193a表达上调。4.2参地颗粒能够下调C-BSA肾炎大鼠肾组织中mi R-193a表达,上调肾组织中足细胞标志蛋白表达,从而减轻足细胞损伤或凋亡,并减轻肾组织病理损伤,这可能是参地颗粒治疗MN、消减蛋白尿的重要机制之一。