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【目的】模拟原发性肝细胞癌免疫微环境，探讨调节性T细胞（Treg）对肝癌细胞HepG2周期的影响及其可能机制。【方法】用免疫磁珠分选法从原发性肝细胞癌患者外周血中分离出调节性T细胞，将调节性T细胞与HepG2细胞按照不同的比例分别共培养48h；MTT法检测HepG2细胞的增殖情况，流式细胞仪检测HepG2细胞周期变化情况及两种细胞表面RANK-RANKL受体配体的表达情况，Real-Time PCR法检测细胞周期相关蛋白、周期蛋白依赖性激酶、周期蛋白-周期蛋白依赖性激酶抑制因子基因表达的变化，Western Blot检测HepG2细胞周期相关蛋白、周期蛋白依赖性激酶、周期蛋白-周期蛋白依赖性激酶抑制因子的变化情况；蛋白芯片法检测共培养体系上清液中所分泌TGF-β、IL-10、IL-17等细胞因子的表达水平。【结果】1.调节性T细胞对HepG2细胞增殖的影响：应用CD4+CD25+CD127dim/-Regulatory T Cell Isolation Kit Ⅱ分选原发性肝细胞癌患者外周血调节性T细胞经流式细胞术检测纯度达(93.83±1.97)%；与调节性T细胞共培养后， HepG2细胞增殖水平提高，用流式细胞术检测HepG2细胞周期发生改变，实验组G1期比例降低，S期、 G2期比例升高。2.调节性T细胞对HepG2细胞周期影响机制的探讨：PCR检测表明，HepG2细胞cyclinB、CDK1基因表达倍率增加，P21基因表达倍率降低,Western Blot实验证实cyclinA、cyclinB含量增高，CDK1、CDK2含量升高，P21含量降低；进一步流式细胞术检测发现，RANK在HepG2细胞表面的表达率为(96.88±2.76)%，RANKL在调节性T细胞表面的表达率为(94.61±1.56)%；用蛋白芯片检测发现Treg细胞与HepG2细胞共培养体系中的IL-6、IL6R、sgp130、IL-17、TGFβ、与对照组HepG2培养上清相比含量明显增多。【结论】调节性T细胞与HepG2细胞体外共培养条件下，调节性T细胞所占比例越高，HepG2细胞增殖越快,细胞周期变化越明显；调节性T细胞可以通过提高HepG2细胞周期蛋白cyclinB、周期蛋白依赖性激酶CDK1的表达以及抑制周期蛋白激酶抑制因子P21的表达来促进HepG2细胞周期的进展。调节性T细胞引起细胞周期变化的机制主要靠调节性T细胞表面的RANKL与HepG2表面的RANK构成RANK-RANKL通路来引起周期变化以及刺激IL-6表达以及IL-17的分泌来改变细胞周期。