【摘 要】
：
研究云南PRV变异分离株遗传变异特性和致病性,为云南PRV分子流行病学研究及PR防控提供科学依据。对560份血清和101份组织样品,分别用ELISA和PCR进行PRV-g B、g E抗体和病原检测;阳性样品分析PRV-g B、g D、g E基因遗传变异,使用BHK-21细胞分离病毒并基因解析;选取30只公大鼠随机分为空白（CC）、经典毒株闽A（MA）、变异毒株1（CK）、变异毒株2（LD）、变异毒
【基金项目】
：
昆明市动物疫病防控技术科技创新中心（2019-1-N-25318000003525）； 云南省重大科技专项“云南省猪重要疫病防控技术体系构建及应用”（202102AE090007）；
论文部分内容阅读
研究云南PRV变异分离株遗传变异特性和致病性,为云南PRV分子流行病学研究及PR防控提供科学依据。对560份血清和101份组织样品,分别用ELISA和PCR进行PRV-g B、g E抗体和病原检测;阳性样品分析PRV-g B、g D、g E基因遗传变异,使用BHK-21细胞分离病毒并基因解析;选取30只公大鼠随机分为空白（CC）、经典毒株闽A（MA）、变异毒株1（CK）、变异毒株2（LD）、变异毒株3（YL）共5组,空白滴鼻PBS 50μL、接毒组分别滴鼻病毒原液50μL,观察临床症状和病理变化,免疫组化抗原定位和病毒载量计算,脏器指数测定,3个时间点血液生理生化指标监测,q PCR 7个器官病毒载量测定、监测唾液和粪便6个时间点的排毒情况。流行病学调查结果显示,PRV-g B、g E抗体阳性率分别为63.6%、0%,病原阳性率为48.5%。PRV-g B、g D、g E基因核苷酸序列与经典毒株闽A株比较,g B基因CK株1个缺失,LD株1个突变和3个缺失,YL株2个缺失;g D基因CK株有2个插入,6个缺失,LD株在6个缺失,YL株1个插入,6个缺失;g E基因CK、LD、YL均有1个插入。分离得到CK、LD、YL 3株PRV变异毒株,测得TCID50分别为10-6.75/0.1m L、10-6.25/0.1m L、10-7/0.1m L;LD株全基因组共测出126717个核苷酸,核苷酸序列与国内外21株毒株比较,同源性在89.4%～94.1%之间,遗传进化分析与14株国内毒株在同一分支上,亲缘关系较近,与7株国外毒株在不同分支,亲缘关系较远;核苷酸序列与经典毒株Bartha株比较共有1279个位点突变、69个位点插入、39个位点缺失。致病性试验发现,除空白组外,大鼠均出现明显PR临床症状,60 h全部死亡;7个器官均有肿大、出血和充血;显微病理变化,LD组大脑损伤严重,YL组心损伤严重,肝CK组损伤严重,脾MA组损伤严重,肺MA组损伤严重,肾LD组损伤严重,睾丸CK组损伤严重,3株变异毒株对脏器损伤强于闽A株;免疫组化抗原定位7个器官均有分布,大脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸中抗原分布最广的分别是MA、LD、YL、MA、CK、YL、CK组,平均光密度值（MOD）最高分别达322、134、235、138、237、197、175;脏器指数均高于空白组,肝脏指数较高,CK组最高,各组之间与MA组比较均差异不显著;大鼠血液生理指标3个变异毒株随时间变化与MA组比较,除红细胞压积（HCT）外,24 h开始均有差异变化;血液生化指标3个变异毒株随时间变化与MA组比较,除免疫球蛋白A（Ig A）、免疫球蛋白G（Ig G）外,24 h开始均有差异变化;q PCR 7个器官病毒载量测定,大脑LD组最高;心LD组最高;肝LD组最高;脾各组间无差异性;肺MA组最高;肾CK组最高;睾丸中CK组最高;唾液36 h排毒量CK组显著高于其他2个变异毒株组。综合分析,3株变异毒株对大鼠的致病性强于经典毒株闽A株,其中LD株致病性较强。结论:1.云南部分地区猪群PRV核酸阳性率达48.5%,存在PRV变异毒株感染。2.分离到的3株PRV变异毒株,分别命名为CK、LD、YL株;与经典毒株闽A株比较g B、g D、g E基因核苷酸序列均有插入和缺失;LD株全基因测序共测出126717个核苷酸,明确了与经典毒株Bartha株比较,存在多位点突变、缺失和插入。3.显微病理变化、免疫组化抗原定位、血液生理生化指标测定等结果明确了3个变异毒株对大鼠致病性强于经典毒株闽A株,LD株对大鼠致病性最强。
其他文献
鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌（Salmonella Pullorum）血清型感染引起的一种流行广泛的急性全身性传染病;该病既可通过卵垂直传播也可通过接触以及媒介水平传播,是造成我国养禽业重大经济损失的禽类传染病之一。目前对于鸡白痢的防治主要有两个手段:一是从种鸡入手进行净化,但本方法费时费力,且需要进行世代净化;二是使用抗生素类药物治疗,但随着家禽养殖中抗生素的滥用,细菌耐药性问题也越来越突出,给养殖
星状病毒（Astrovirus,Ast V）是一种能引起哺乳类动物和禽类动物肠胃炎的人畜共患传染病病原,给养猪业健康发展带来了严重威胁。然而,在中国猪生产省份之一的云南省,没有关于PAstV流行病学的报告,该省的猪存栏量约为3145万头。鉴于目前云南省尚未开展有关猪星状病毒（Porcine Astrovirus,PAstV）流行病学的调查与研究,本研究使用RT-PCR检测方法对云南省猪群进行PAs
禽流感是一种由禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）引起的一种高度接触性禽类传染病。根据对SPF鸡的致病性强弱可分为高致病性禽流感（Highly pathogenic avian influenza,HPAI）和低致病性禽流感（Low pathogenic avian influenza,LPAI）。其中高致病性禽流感为H5亚型和H7亚型AIV引起的,低致病性禽流感主要由
犬呼吸道感染综合症（Canine lnfectious Respiratory Disease Complex,CIRDC）,是犬呼吸道疾病的统称,一般由潜在的病毒、细菌、寄生虫、支原体等以及环境应激、饲养管理不当和犬机体免疫力下降等因素相互作用而引起。临床上以持续咳嗽、大量鼻液、出现啰音等表现为特征。其病原复杂多样,易发生误诊;常存在治疗不彻底、病情反复等现象,尤其是抗菌药物使用不规范,对公共卫
随着生活水平的不断改善,人们越来越注重科学健康的生活方式,对于葡萄酒饮品的消费也越来越多,但中国人均葡萄酒消费量远低于国际水平。中国现代葡萄酒酿造产业起步较晚,在酒葡萄原料处理、发酵、葡萄酒酿造技术、产品品牌影响力、消费者黏性上普遍与国外发达国家存在差距。中国加入WTO之后,发达国家的世界知名品牌葡萄酒逐渐打入中国市场,在一定程度上推动了中国葡萄酒产业的发展,但也导致更加激烈的市场竞争,本土葡萄酒
冠状病毒是人和动物的重要病原体,目前在世界范围内普遍流行的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）对人类健康危害尤其值得关注。SARS-CoV-2是β冠状病毒属的一个新成员,有研究表明猫对该病毒高度易感,但未见昆明市猫是否携带该病毒或类似病毒的研究报道。同时,猫有自己的α冠状病毒——猫冠状病毒（FCoV）,是引起猫传染性腹膜炎（FIP）的病原,其是否存在与SARS-CoV-2的重组不得而知。本研究对2
目的：设计制作乳腺癌患者术后引流液观察装置，并观察临床应用效果。方法：制作引流观察装置。选取在天津医科大学肿瘤医院乳腺二科工作的25名护士为观察对象。采用自身前后对照的方法，对照组采用传统方法观察并计量乳腺癌患者术后引流液，观察组使用观察装置观察计量引流液。比较两组观察计量引流液的时间以及计量的准确度。结果：观察组操作所用时间为（8.10±1.14）s，对照组操作所用时间为（18.43±2.11）
随着互联网、人工智能等现代信息技术的不断发展,税收领域传统的纳税服务已不能满足社会经济发展的需要。纳税服务作为与纳税人联系最紧密的环节,为整个税收工作的顺利完成提供了核心支撑,因此在税收征管体制不断改革的时代,它也被提到了新的战略高度,被赋予了新的使命。对如何优化信息化纳税服务这一问题进行研究,旨在着力建设以税收大数据为主要驱动,以为纳税人缴费人提供服务功能更加集成、安全性更高、应用效能更高为目标
随着我国经济的高速发展以及企业之间的竞争日益加剧,如何在资源有限的情况下实现长远发展,将发展思路从“企业资源规划”变为“企业战略规划”成为许多企业思考并想要解决的难题。战略指引了全面预算管理的发展,而全面预算管理保障了战略的实现,二者相互契合。基于战略导向的全面预算管理体系将企业战略与预算管理有效衔接,使预算牢牢围绕战略开展,将战略贯穿于企业活动中,有效促进了企业战略目标的落实。根据国内外研究现状
当今社会经济在高速地发展,社会保障问题成为了大众关注的焦点问题,社会保险制度作为社会保障制度的核心内容,其重要性不言而喻,而社会保险费的征管问题自然也成为了社会热点话题。社保费征管体制改革以后,社保费的征管职责从经办机构划转到了税务部门,但是当前税务部门的社保费征管仍然存在着诸多的问题,有待进一步的优化。对此,本文以唐山市Q市税务局为研究对象,着重分析当前税务部门社保费征管的现状、存在的问题及成因