香茅醛对金黄色葡萄球菌生长和产毒的抑制作用及其应用

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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是肉及肉制品中常见的食源性致病菌,对食品安全和消费者身体健康带来严重威胁,因此肉及肉制品中S.aureus的减控对保障食品安全十分重要。本文通过体外抑菌实验研究了香茅醛(citronellal,CIT)对S.aureus的抑菌效果及机理,并探究了CIT对S.aureus产肠毒素及溶血活性的影响及可能的作用机理。此外,将CIT应用于冷鲜猪肉,探究了CIT处理对冷鲜猪肉在贮藏期微生物生长及品质变化的影响。以期为扩大CIT在食品工业中的应用提供科学依据。主要研究内容及结论如下:通过体外抑菌实验,研究了CIT对S.aureus的抑菌效果及其机理。CIT对S.aureus的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均为0.8 mg/m L,1.6 mg/m L的CIT在0.5 h内可完全抑制S.aureus。胞外K+浓度测定、碘化丙啶染色及扫描电镜观察结果显示低浓度CIT(<0.8 mg/m L)会导致胞内大分子及小分子物质的泄出,高浓度CIT(0.8-1.6 mg/m L)处理可改变细胞形态,导致细胞破裂,进而造成细胞死亡。此外,采用凝胶电泳、紫外可见光谱、圆二色光谱及分子模拟分析了CIT与S.aureus DNA的相互作用方式,结果表明,CIT可能通过沟槽结合的方式与DNA相互作用,改变DNA的结构。通过上清液中肠毒素浓度及溶血活性的测定探究了CIT对S.aureus产毒株ATCC29213产肠毒素(肠毒素A-肠毒素E)及溶血活性的影响,结果表明,亚抑制浓度CIT可在不影响S.aureus的生长繁殖的情况下显著降低S.aureus培养上清液中的肠毒素水平及溶血活性(p<0.05),且呈浓度依赖性。通过RT-PCR探究CIT处理对S.aureus产毒素的减控机理。RT-PCR实验结果表明CIT处理可显著下调S.aureus的毒力基因及毒力调控基因转录水平(p<0.05)。此外,将CIT应用于冷鲜猪肉,探究了CIT对S.aureus在肉制品上产肠毒素的影响,结果发现,CIT可显著降低S.aureus在冷鲜猪肉上产肠毒素水平。将CIT应用于冷鲜猪肉上,通过微生物计数、p H值、挥发性盐基氮(TVB-N)含量及硫代巴比妥酸值(TBARS)的测定,探究了CIT处理对冷鲜猪肉的保鲜效果。微生物计数、p H值和TVB-N含量的实验结果表明,CIT处理可有效抑制冷鲜猪肉中S.aureus等微生物的生长,减少冷鲜猪肉中TVB-N的产生,抑制其p H值的升高。此外,TBARS的测定结果显示,贮藏期间,处理组样品的TBARS值均显著低于对照组样品,表明CIT可有效减缓冷鲜猪肉的脂肪氧化。综合评估,在符合我国农业部关于冷却猪肉的微生物安全限量标准(6 log CFU/g)及GB 2707-2016中TVB-N的限值(15 mg N/100 g)下,CIT处理可将冷鲜猪肉的货架期从5 d延长至8 d。综上,CIT对S.aureus的生长和产毒有显著的抑制作用,应用于冷鲜猪肉中可有效抑制S.aureus等微生物及的生长并延长货架期,具有良好的应用前景。
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