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目的胰腺癌是消化系统常见的恶性肿瘤,侵袭力强,死亡率高,在美国胰腺癌的发病率居所有恶性肿瘤发病率的第四位,在我国,占第五位,而病死率在全球也呈逐年上升的趋势,目前,手术切除仍是治疗胰腺癌最为有效的方法,但是,由于胰腺癌发现时多为晚期,伴淋巴、血液及相邻器官的转移,即便能成功进行手术切除,美国报道术后1年生存率为10%,5年生存率仅为1%,中国报道5年生存率为5%,英国报道1年生存率为8%,5年生存率仅为0.4%。因此,胰腺癌已成为国内外医学界难点之一。而中国医学科学院肿瘤医院和中国协和医科大学肿瘤医学院经过研究并在中国胰腺癌研讨会上做出了重要报告：局限于胰腺内的,无淋巴结转移的小胰腺癌(直径<2cm),根治性切除术后,5年生存率达40%,中位生存期可延长至32个月,事实上,胰腺癌很少局限在胰腺内,直径<2cm的肿瘤至少30%已有淋巴转移；而肿瘤直径<1cm者,常局限于胰腺导管上皮未浸润胰腺实质,术后5年生存率可达100%。由此可见,早期诊断是提高胰腺癌治疗效果的关键措施之一。近年来,随着对胰腺癌研究的深入,除了众所周知的癌基因p53,k-ras等基因在肿瘤细胞凋亡过程中的作用和机制,趋化因子与肿瘤的关系已成为新的研究方向,趋化因子属于细胞因子超家族,通过与其受体的相互作用能诱导靶细胞趋化性迁移,增强靶细胞与内皮细胞的黏附能力等,广泛参与细胞的生长、发育、分化、凋亡等多种生理功能。最近研究表明,趋化因子在肿瘤的发生发展、血管生成和侵袭转移中亦起着重要作用,趋化因子家族与肿瘤的关系已成为肿瘤生物学研究中的热点。Kleeff等发现胰腺癌组织存在CC类趋化因子CCL20/Mip-3a及其受体CCR6mRNA的表达,体外实验表明Mip-3a可以显著促进人胰腺癌细胞COLO--357的增殖,认为Mip-3a可通过旁分泌或白分泌的方式促进胰腺癌的发生发展。实验发现胰腺癌组织和人胰腺癌细胞系中存在CC类趋化因子,CCL20/MIP-3a及其受体CCR6的表达,且MIP-3a呈剂量依赖性提高PANC-1细胞体外侵袭力。进一步实验表明,MIP-3a可显著增加PANC-1细胞中MMP-9蛋白表达水平,而使用CCR6或MMP-9抗体均可降低PANC-1细胞的侵袭力,提示MIP-3a与其受体CCR6结合后,通过诱导MMP-9表达,促进胰腺癌侵袭转移。慢性胰腺炎已经被证实是胰腺癌发生发展过程中的高危因素,慢性胰腺炎作为胰腺癌高危因素与其他因素密切相关,如吸烟,酗酒,肥胖,高龄以及分子突变。由于,CCL20在慢性胰腺炎中表达非常微弱,因此在由慢性胰腺炎向胰腺癌转化过程中,CCL20/CCR6的作用可以排除。CCL20mRNA只在胰腺癌组织中高表达,而在正常胰腺组织及慢性胰腺炎中表达并无升高。相较,CCR6mRNA不仅在胰腺癌中高表达,与正常胰腺组织相比在慢性胰腺炎中同样存在高表达。CCR6在多种肿瘤疾病中都有高表达。另有报道,CCR6在炎症疾病中同样有高表达。本实验是为了了解胰腺癌组织、癌旁组织及胰腺正常组织、慢性胰腺炎组织中CCL20/CCR6的表达情况,最终获得其与肿瘤发生发展的关系,从而为胰腺癌的早期诊断提供有效地措施。方法试验对象是2008年11月至2010年12月份在天津南开医院胆胰外科住院手术治疗的16例胰腺癌及慢性胰腺炎患者手术切除的组织,术中标本取出后立即切取一部分迅速置于液氮中冷冻,然后置于-80℃保存备用,剩余送往病理室做病理检查。全部患者均经病理证实为胰腺癌及慢性胰腺炎,全组平均年龄59.7岁,胰腺癌患者男6例,女4例；慢性胰腺炎患者男5例,女1例,详细记录肿瘤临床病理学参数,同时收集癌旁组织及距癌灶5厘米以上正常胰腺组织作为对照。本实验采用美国Promega公司TotalRNA提取试剂盒,按照说明提取组织总RNA,然后进行逆转录合成cDNA,最后行荧光定量PCR检测CCL20/CCR6在胰腺癌组织及癌旁及慢性胰腺炎和正常胰腺组织中表达水平。采用2-ΔΔCT算法计算癌组织与癌旁组织中及炎症组织、慢性胰腺炎组织中CCL20/CCR6表达量的比值,结合术后病理参数,分析CCL20/CCR6在不同病理特征胰腺病组间表达的差异。试验结果采用SPSS17.0软件进行t检验,秩和检验或fisher确切概率法检验,P＜0.05认为有统计学意义。结果本实验结合术后病理资料,分析了10例胰腺癌和6例慢性胰腺炎患者的临床病理因素与CCL20/CCR6表达差异的关系,在胰腺癌中的表达,CCL20/CCR6表达高低与包括肿瘤大小、淋巴结转移有无、淋巴管癌栓有无浸润深度、组织类型、生长方式等因素密切相关,统计学结果显示在不同组织类型组别中,CCL20/CCR6表达水平存在明显差异,随着恶性程度增加,CCL20/CCR6表达上调比例明显增加,差异有统计学意义(P=0.001),在慢性胰腺炎中CCL20表达微弱,CCR6表达与慢性胰腺炎分型无关。结论1、cDNA引物延伸荧光定量PCR法是一种简单有效地CCL20/CCR6的检测方法。2、CCL20/CCR6上调与胰腺癌TNM分期密切相关(p<0.05), CCL20/CCR6的高表达可能预示着胰腺癌的进展程度,为胰腺癌的早期诊断和治疗提供依据。3、CCL20/CCR6mRNA在正常组织、癌前病变及恶性病变的胰腺癌组织中的表达：CCL20mRNA在胰腺癌组织中的表达较相邻正常胰腺组织中高8倍,癌旁组织中为相邻正常组织的6倍(p<0.05), CCL20mRNA在正常胰腺组织中同慢性胰腺炎中表达都很微弱。CCR6mRNA在胰腺癌表达量是正常组织中的6倍,在慢性胰腺炎中表达是正常组织中的3倍。(p<0.05),有统计学意义。