葵花籽粕多肽的制备及其抗氧化性研究

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葵花籽粕是油葵榨油时的副产物,目前仅被用作饲料或肥料,这使得葵花籽粕中的营养物质没有得到充分利用,特别是其中的生物活性物质被忽视。高营养价值的葵花籽粕的利用率不高导致产品增值较低,可见,葵花籽粕精深加工是目前亟待解决的问题。近几十年,功能性多肽行业快速发展,生物活性肽的发展为葵花籽粕的精深加工带来了新思路。葵花籽粕蛋白酶解物具有较多的生物活性,如抗氧化、降低胆固醇、抗血栓、激素作用、促进生长、改善食品风味等。多肽多样的生物活性功能和良好的加工特性使其逐渐成为研究的热点。本论文主要对葵花籽粕多肽的高效制备、精制及其抗氧化活性的确定进行研究,主要结果如下:(1)通过单因素试验和Box-Behnken试验确定最佳双酶(碱性蛋白酶及木瓜蛋白酶)酶解条件为:时间200min、酶底比([E]/[S])2%、pH 7.6、酶解温度50℃、复合酶比例2.5:1、底物浓度2%,此条件下,葵花籽粕多肽液对O2-·和·OH清除率分别为58.06%和46.72%。(2)通过单因素试验和Box-Behnken试验确定超声波预处理葵花籽粕蛋白的条件为:超声波处理时间21min、超声波处理功率为额定功率(250W)的75%、超声波处理温度34℃。此条件下,葵花籽粕多肽液对O2-·和·OH的清除率分别为67.11%和52.47%。(3)通过单因素试验和Box-Behnken试验确定微波预处理葵花籽粕蛋白的条件为:微波处理温度57℃、微波处理功率500W、微波处理时间3min。此条件下,葵花籽粕多肽液对O2-·和·OH清除率分别为72.78%和54.13%。(4)通过单因素试验得出脱盐的最佳条件为:阴阳离子树脂比例3:2、酶解液pH4.5、过柱速度8倍柱/h。在此条件下,脱盐率为84.54%、O2-·及·OH清除率分别为57.08%和43.62%。对脱盐后的多肽液进行超滤,最佳超滤条件为:压力0.16MPa、流速2.5mL/s、时间60min。在此条件下,渗透通量为25.98 L/m2·h、膜污染度为0.021、O2-·及·OH清除率分别为86.58%和73.02%。(5)葵花籽粕多肽液表现出的抗氧化活性较强。其总还原能力及对H2O2、·OH、DPPH·及O2-·清除率均与浓度呈明显的量效关系;·OH、DPPH·及O2-·清除率的IC50值分别为4.09mg/mL、2.69mg/mL、3.89 mg/mL;对豆油氧化作用的抑制能力也较强,且随天数的增加而增强。通过上述试验制备得到的葵花籽粕多肽,不仅具有较高的抗氧化活性,同时也为葵花籽粕多肽的工业化生产提供一定的理论依据。
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