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第一部分 结直肠癌患者与血浆网膜素-1水平变化的相关因素分析目的:探讨血浆脂肪因子网膜素-1(Omentin-1)水平和结直肠癌(CRC)的相关关系。方法:选取经术后病理检查明确诊断为CRC患者42例(肿瘤组)和接受纤维结肠镜检查为正常的健康志愿者42例(对照组),两组间年龄、性别均匹配。采用ELISA法测定肿瘤组以及对照组结肠镜检查前空腹血浆omentin-1水平,应用SPSS20.0统计软件,组间比较采用t检验。应用Pearson相关分析以及多元线性回归分析方法,分析血浆Omentin-1与其他变量之间的相关关系。检验水准p=0.05。结果:两组间年龄、性别构成、腰臀比(WHR)、体重指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、甘油三酯(TG)、HDL-C(高密度脂蛋白),空腹血糖(FBG)差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,肿瘤组LDL-C(低密度脂蛋白,0.94±0.43 vs 0.61±0.33,P<0.05)、FINS(空腹胰岛素,9.44±6.11 vs 7.03±3.49 m U/L,p<0.05)、HOMA-IR(胰岛素抵抗指数,0.94±0.43 vs0.61±0.33,P<0.05).、Omentin-1(71.54±31.80 vs 31.22±19.87 ng/m L,P<0.001)明显增高,TC(总胆固醇,3.27±1.14 vs4.83±1.08 mmol/L)则明显降低(P<0.05)。Pearson相关分析显示,血浆Omentin-1与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关(相关系数r=0.57,P<0.01),与血清甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、腰臀比(WHR)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均呈负相关(相关系数r分别为-0.668、-0.493、-0.395、-0.371,P<0.05~0.01)。多元逐步线性回归分析显示,TG、HDL-C、WHR为CRC患者血浆omentin-1的影响因素。结论:Omentin-1可能与CRC发生有关。第二部分网膜素-1对人结肠癌SW480细胞生物学行为影响的研究目的观察在高糖环境下不同浓度的网膜素-1(Omentin-1)对人结肠癌细胞株SW480增殖和凋亡的影响;探讨AKt(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶)信号通路在Omentin-1抑制结肠癌细胞凋亡过程中的作用。方法将不同浓度(0μg/m L、1μg/m L、5μg/m L)的Omentin-1加入葡萄糖含量为4.5 g/L的高糖培养基(DEME培养基)中培养的结肠癌细胞株SW480 24h、48h,分为高糖不加Omentin-1组(网膜素0组)、高糖+1μg/m L Omentin-1组(网膜素1组)、高糖+5μg/m L Omentin-1组(网膜素2组),同时应用葡萄糖含量为1.0 g/L的低糖培养基(DEME培养基)培养SW480细胞作为对照组(NC组)。应用MTT法以观察细胞的增殖活性;划痕实验检测细胞的迁移;平板克隆形成检测细胞的克隆形成能力;在每组中加入4μg/m L DDP(顺铂),应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;应用Western blot检测细胞内Akt及磷酸化p-Akt蛋白表达情况。结果(1)在MTT实验中,应用Omentin-1干预SW480细胞24 h后,网膜素2组细胞吸光度值(OD值)较网膜素0组、网膜素1组均显著增高(P<0.05);干预48 h后,网膜素1组、网膜素2组OD值均较网膜素0组显著增高(P<0.05),且网膜素2组较网膜素1组OD值显著增高(P<0.05)。(2)在划痕实验中,实验组与对照组相比,Omentin-1干预后24 h的细胞迁移速率随着浓度的增加而增快,促进了划痕的愈合;网膜素干预后48 h时后尤为明显。(3)在平板克隆实验中,实验组与对照组相比,随着Omentin-1浓度的增大,克隆形成数目及大小随之增加。(4)在细胞凋亡检测中,应用不同浓度的Omentin-1与DDP共同干预SW480细胞12 h后,网膜素2组细胞凋亡率显著低于网膜素0组、网膜素1组(P<0.05)。(5)Western-blot结果显示:与网膜素0组比较,网膜素1组、网膜素2组p-Akt蛋白表达均显著增高(P<0.05);网膜素2组p-Akt蛋白表达较网膜素1组显著增加(P<0.05)。结论(1)Omentin-1可促进结肠癌细胞株SW480细胞的增殖,抑制其凋亡,效应呈浓度和时间依赖关系。(2)Omentin-1可促进结肠癌细胞迁移能力及克隆形成能力。(3)Omentin-1抑制凋亡效应可能与Omentin-1通过激活Akt通路有关。