论文部分内容阅读
缺血性脑血管疾病已成为目前危害中老年人健康的疾病之一，并越来越趋于年轻化，约占脑血管疾病的43-65%，病死率约占15-25%，其较高的致残率和死亡率严重影响患者的生活，并且给家庭及社会带来沉重的负担，因此越来越受到关注。在局灶性脑缺血的病理机制及临床研究中发现，缺血中心区神经元死亡以坏死为主，而缺血中心区周围的神经元则以继发性死亡为主，即以凋亡为主。凋亡主要发生在半暗带区域，此区域被认为是脑缺血的治疗目标，凋亡过程是由多种基因共同参与完成的，其中HIF-1α和Bcl-2作为促进神经再生及抗凋亡而达到神经保护作用的重要因子，本研究通过分析急性脑梗死病人外周血中的HIF-1α、Bcl-2相关表达变化，结合临床资料，旨在探讨二者在脑梗死发生、发展中的作用及意义。目的：临床观察急性脑梗死(Acute Cerebral Infarction,ACI)患者外周血中低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1α）和Bcl-2基因（即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）在急性期各时相点的表达水平，探讨两种因子在脑梗死急性期的作用，以及二者之间的关系。方法：1）研究对象：脑梗死组全部为2012年10月至2013年2月在四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科住院治疗的急性脑梗死患者，共30例。其中，男性患者18例，女性患者12例，年龄在47-80岁之间，平均年龄（62.20±9.05）岁。正常对照组为同一时期在我院健康体检者或志愿者，共30人。其中男性16人，女性14人，年龄在45-78岁之间，平均年龄(60.98±8.77）岁，均符合纳入标准及排除标准。对入选的脑梗死患者和正常对照组的基本资料如年龄、性别构成，吸烟饮酒史、血压、血糖、LDL、甘油三酯、肝肾功能等指标进行对比，观察有无可比性。2）病例组分别于发病后0.5d、1d、2d、3d、5d、7d、10d共7个时间点于肘前静脉采血，3ml左右。正常组只采一次血。3）应用酶联免疫分析(ELISA)法检测两组外周血中HIF-1α和Bcl-2在各个时间点的表达水平，比较HIF-1α和Bcl-2两组之间浓度的变化。4）通过头颅MRI进行脑梗死体积计算：脑梗死体积=A×B×C×层厚×π/6(其中A为梗死灶的最大长径，B为与长径相垂直的直径，C为MRI扫描的阳性层数，π为圆周率)。5）对所有入组患者都进行NIHSS(美国国立卫生研究院脑卒中量表)评分，以评估患者的神经功能状况。6)统计学方法：采用SPSS17.0统计分析软件对数据进行处理。所有计量数据均以均数±标准差（x±s）表示。采用独立样本t检验评价正常组梗死组一般资料的差异性，运用单因素方差分析脑梗死急性期不同时间点HIF-1α、Bcl-2表达及评价不同体积梗死组之间血清HIF-1α、Bcl-2分别在不同时间点的差异性；运用双变量相关分析血清HIF-1α、Bcl-2与NIHSS评分之间的相关性及HIF-1α与Bcl-2之间的相关性。结果：1、HIF-1α的表达：脑梗死患者血清HIF-1α表达在发病0.5d、1d、2d、3d、5d、7d均较正常组增高，其中在1d、2d、3d、5d显著增高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。在发病1d与其他时间点比较有统计学差异（P＜0.05）。但与2d比较无差异，P=0.140。HIF-1α表达和NIHSS评分之间不存在相关性（P＞0.05）。正常组与脑梗死不同体积组在各个时间点患者血清HIF-1α的表达有统计学差异（P＜0.05）。三组间进行两两比较，发现小梗死组与大梗死组、中梗死组与大梗死组之间均有统计学差异(P＜0.05)，小梗死组与中梗死组无统计学差异（P＞0.05）。2、Bcl-2的表达：脑梗死组血清Bcl-2浓度表达发病0.5d、1d、2d、3d、5d、7d均较正常对照组增高，其中在1d、2d、3d、5d显著增高，差异具有统计学意义（P＜0.01）。1d与其他时间点进行比较，有显著差异性（P＜0.01）。Bcl-2表达和NIHSS评分之间不存在相关性（P＞0.05）。正常对照组与脑梗死不同体积组在各个时间点患者血清HIF-1α的表达进行比较，有统计学差异（P＜0.05）。三组间进行两两比较，发现三组之间均具有统计学差异(P＜0.05)。3、HIF-1α与Bcl-2的关系：二者存正向相关性（P＜0.01），相关性分析统计结果是R=0.45。结论：1、脑梗死急性期血清HIF-1α浓度表达呈动态变化规律，在发病0.5d即表达增高，之后迅速升高，1d达到高峰，随后从2d到10d逐渐下降，但在10d其浓度表达仍高于正常组水平。提示HIF-1α可能参与脑梗死急性期病理生理过程，可能与脑缺血、缺氧后的神经保护有关。2、血清Bcl-2表达亦发病0.5d即表达增高，之后迅速升高，1d时达峰值，随后逐渐下降，在10d基本回到正常组水平。作为重要的抗凋亡因子，可能参与大脑缺血缺氧后的神经保护作用。3、HIF-1α和Bcl-2均与发病0.5d开始表达，1d达到峰值，之后逐渐呈下降趋势，10d基本回到正常水平，二者存在正向调节作用。4、HIF-1α/Bcl-2可能与脑梗死的损伤程度及梗死的体积大小有关系，可能对判断病情的严重程度有一定的重要性。