【摘 要】
：
融合蛋白技术是在现今成熟并且应用广泛的生物工程手段,利用分子生物学手段构建的促凋亡融合蛋白表达载体在癌症研究和肿瘤基因治疗领域发挥着重大作用,本课题构建两种促凋亡
论文部分内容阅读
融合蛋白技术是在现今成熟并且应用广泛的生物工程手段,利用分子生物学手段构建的促凋亡融合蛋白表达载体在癌症研究和肿瘤基因治疗领域发挥着重大作用,本课题构建两种促凋亡的融合蛋白表达载体,分别命名为pCTEL-FLAG-Bok和pCDNA-GZMB-CASP3(GZMB为GranzymeB颗粒酶B的缩写,CASP3为Caspase3的缩写),再转染到多种细胞中表达融合蛋白,并且初步的在细胞和蛋白水平研究其促凋亡及抑制细胞增殖的作用,最后将两种促凋融合蛋白的作用进行比较。为研究pCTEL-FLAG-Bok和pCDNA-GZMB-CASP3的功效,我们将其转染入COS7,Hela,MCF7细胞中,Western Blot方法检测融合蛋白的表达情况,再在细胞和蛋白水平上研究其功效,在细胞形态学水平上,我们利用显微镜及多种染色手段观察融合蛋白表达后引起的细胞形态变化来判断其凋亡与否;在蛋白水平上,我们用Wesern Blot方法在蛋白水平检测凋亡下游蛋白的表达来证明其促凋亡效果,最后用MTT发检测融合蛋白对细胞增殖速率的影响,并将两种蛋白的促凋抑癌功效加以比较。结果表明,两种蛋白均能在肿瘤细胞中表达,而pCTEL-FLAG-Bok不能在COS7细胞中表达。表达两种融合蛋白后细胞均出现部分凋亡细胞的形态,Western Blot实验也检测到凋亡标志性蛋白的表达,证明两种融合蛋白均如设计目的一样为促凋融合蛋白。MTT实验结果显示,两种融合蛋白均不同程度的抑制肿瘤细胞的生长。所以本课题构建的两种融合蛋白表达载体pCTEL-FLAG-Bok和pCDNA-GZMB-CASP3可以作为今后的研究和基因治疗有用的促凋蛋白表达载体。
其他文献
本文运用SWOT分析法对税收征管现代化的评价要素进行了分析,并提出了持续推动税务机关征管现代化改革,同步开展税收征管质量评价体系建设的设想。
目的观察灯盏细辛注射液联合心肌康颗粒治疗病毒性心肌炎的临床疗效。方法选取2011年7月—2017年2月在湖北医药学院附属人民医院诊治的病毒性心肌炎患者128例为研究对象,随机
针对传统安全监管手段和模式已很难适应当前迅速变化的复杂安全生产形势这一局面，文章从国家层面对企业安全生产监管计算机化进行了系统性分析，提出了建模方法，提供了基于．NET技
海啸是严重的地震次生灾害之一,简要介绍了海啸的成因、分布、量度、传播特征及对我国的影响;并就国际及我国如何加强海啸监测,联合建设预警预报系统提出建议.
第一部分:188Re标记锡硫胶体的方法学研究目的建立188Re标记锡硫胶体的方法,并研究其稳定性和颗粒大小。方法1.标记药盒法:（1）改变加入硫胶体药盒（SC kit,供99mTc标记用）的188Re
目的检测经137Csγ射线辐照红细胞悬液后淋巴细胞凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达水平,并分析其临床意义。方法利用Fas-异硫氰酸荧光素（FITC）、FasL-FITC、Bcl-2-FITC、
什么是定作人的安全保障义务以及定作人违反该项义务应承担何种责任近年来成为民法学界和社会所关注的问题。本文阐述了安全保障义务的内涵;指出在司法实践中,应结合定作人对
改革开放以来,我国的经济飞速发展,各行各业进入了腾飞阶段,而这些都要依赖于电力的供应,当今世界,电能已经成为了保障城市经济发展的基础,一旦出现电力配电线路运行故障,将
[目的]为毛坯钻石准确估价提供有效解决方案.[方法]本文采用价值链分析方法,即从研究钻石价值链入手,以成品(抛光)钻石的分级体系为基础.[结果]建立了针对估价需求的毛坯钻石
<正>Wuhan, Hubei地点/湖北武汉设计/2009-2016年/竣工/2016年Design Stage 2009-2016Completion 2016业主武汉天河机场有限责任公司合作单位中国民航机场建设集团公司规划设