目的：利用反义核酸技术封闭胃癌细胞的谷氨酰胺酶基因，观察反义GAcDNA能否对胃癌细胞的恶性表型有所逆转，为肿瘤的基因治疗探索一条新途径，也为后续研究及临床应用奠定基础。 方法：首先利用标准的基因重组技术构建含有GAcDNA片段的反义真核表达载体pcDNA3.0／GA，通过脂质体介导转入胃癌细胞SGC-7901，经筛选、鉴定，命名为SGC-7901^GA，再通过MTT法测定该细胞生长曲线，采用免疫组织化学方法（S-P法）检测肿瘤细胞增殖细胞核抗原（PCNA）表达情况，采用TUNEL法检测肿瘤细胞细胞凋亡情况，观察反义核酸转染后胃癌细胞生物学活性的改变。 结果： 1．将GAcDNA片段反向插入到真核表达载体pcDNA3.0，构建了反义真核表达载体pcDNA3.0／GA，经酶切及基因测序证实重组质粒成功，命名为pcDNA3.0／GA。 2．pcDNA3.0／GA通过脂质体介导转染胃癌细胞SGC-7901，PCR证实GAcDNA目的片段已经整合到了SGC-7901细胞基因组，获得的G418抗性细胞命名为SGC-7901^GA。 3．MTT法测定细胞生长曲线，发现SGC-7901^GA与对照组的细胞生长数目在各时相点存在显著性差异（p＜0.05），提示SGC-7901^GA生长速度减慢。 4．pcDNA3.0／GA转染SGC-7901胃癌细胞后出现PCNA表达较对照组显著下降，说明肿瘤细胞的增殖活性在实验条件下明显减弱。 5．检测胃癌细胞的凋亡情况表明重组质粒转染后SGC-7901^GA的TUNEL阳性细胞数量显著上升，与对照组比较，差异显著。 结论： 本实验通过含有GA cDNA片段的反义真核表达载体pcDNA3.0／GA转染胃癌细胞株，发现肿瘤细胞的增殖能力减弱，肿瘤细胞的凋亡指数增加，提示肿瘤细胞恶性程第三军医大学硕士学位论文度有所降低，反义核酸技术封闭谷氨酞胺酶基因可能成为肿瘤基因治疗的一条新途径。