脑梗死后脑可塑性机制及针刺影响的研究

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一、本研究进行了以下几方面的研究工作(一)基础部分 ①用改良后的线栓法建立Wistar大鼠MCAO模型;②MCAO大鼠随机分为针刺(A)组、梗死对照(B)组和正常对照(c)组,针刺方法;动物清醒后立即给予针刺,双侧内关穴及足三里穴加电针,强度以大鼠肢体颤动为度,百会穴施以平补平泻法,以医生手下感到沉紧为度。缺血1d组及3d组给予针刺一次,缺血7d组给予针刺6次,缺血14d组给予针刺13次。观察针刺对MCAO大鼠行为学恢复的影响;③用免疫组织化学方法检测MCAO后1d、3d、7d、14dA组和B组梗死灶周围皮层、对侧对应皮层MAP2表达特点,并以正常大鼠为对照。探讨针刺对树突可塑性的影响。④用免疫组织化学方法检测MCAO后1d、3d、7d、14dA组和B组梗死灶周围皮层、对侧对应皮层SYN表达特点,并以正常大鼠为对照。探讨针刺对突触可塑性的影响。⑤用原位杂交方法检测MCAO后1d、3d、7d、14dA组和B组梗死灶周围皮层、对侧对应皮层GAP43mRNA表达特点,并以正常大鼠为对照。 探讨针刺对轴突可塑性及神经再生的影响。⑥用原位杂交方法检测MCAO后1d、3d、7d、14dA组和B组梗死灶周围皮层、对侧对应皮层nestinmRNA表达特点,并以正常大鼠为对照。 探讨针刺对神经再生的影响。 (二)临床部分 针刺促通术的临床评价 <WP=106>1 治疗组 (1)治法:针刺促通术。(2)取穴:①肢体肌张力高,有异常运动模式者:早期以诱发患肢运动能力,促进共同运动为目的,上肢选取屈肌侧穴位,如玄门、尺泽、内关、列缺、劳宫。下肢选取伸肌侧穴位,如髀关、伏兔、足三里、解溪。后期以促进肢体分离运动为主,上肢选取伸肌侧穴位,如曲池、手三里、外关、合谷。下肢选取屈肌侧穴位,如环跳、承扶、委中、承山、昆仑、涌泉。②肢体肌张力低下者:伸、屈侧穴位均选取,平衡地促进患肢肌力,肌张力的恢复。(3)针刺方法:①无痛进针:短持针,快进针。②提插、捻转,以搓法为主要方法,以诱发患者的针感。③给予强刺激量。④不留针,10d为1疗程。2 对照组 (1)治法:取阳明经为主,辅以太阳,少阳经。(2)取穴:上肢取曲池、手三里、外关、合谷。下肢取环跳、阳陵泉、伏兔、足三里、丰隆、解溪、昆仑。(3)针刺方法:平补平泻。 3 评价指标: 从肌力、肌张力、神经功能缺损评价,Fugl-Meyer评价,Barthel记数记分,比较两组治疗前后疗效。二、本研究的主要结果如下(一)基础部分 1 MCAO模型大鼠术后1d及3d评价神经功能缺损明显。TTC染色均以额颞叶皮层及基底节为主的缺血梗死灶,梗死体积占全脑体积的62.3±1.24%。光镜显示了典型的脑缺血梗死表现。2 梗死灶中心区无MAP2阳性染色,边缘区仅见少量阳性短树突纤维。梗死灶周围皮质阳性神经元及树突纤维减少,缺血对照组:MAP2在病灶区从缺血后1d即出现表达减少,3d达最低点,7d表达开始增加,14d表达进一步增高但不及正常表达数值。病灶对侧区从缺血1d始表达可见增高;针刺组:针刺后阳性表达率增加。A组和B组比较有明显差异。 <WP=107>3 梗死灶中心区无明显SYN阳性染色,梗死灶周围皮质光密度值于1d3d表达减少,7d达最低值,14d开始增高但不及正常表达数值。病灶对侧区从1d开始表达增加。 针刺组;针刺后阳性表达率增加。A组和B组比较有明显差异。 4 梗死灶中心区无明显GAP43mRNA阳性染色,梗死灶周围皮质光密度从1d可见增加但增加幅度不明显。病灶对侧区从1d表达增加。 针刺组:针刺后阳性表达率增加。A组和B组比较有明显差异。 5 梗死灶中心区无明显nestinmRNA阳性染色,梗死灶周围皮质光密度从1d见表达略有增多。 在病灶对侧区表达未见增加。 针刺组:针刺后阳性表达率增加。A组和B组比较有明显差异。 (二)临床部分 针刺促通术主要针对肢体运动功能进行评价,采用现代康复评价表:肌力、肌张力、神经功能缺损评价、Fugl-meyer评价、Barthel记数记分法。针刺促通术优于传统针刺法。 三、本研究的主要结论(一)基础部分 1针刺可明显促进MCAO大鼠神经功能恢复。2 MCAO大鼠梗死灶周围皮层MAP2及SYN变化明显、对侧对应皮层表达增加。表明存在明显的树突和突触可塑性变化,针刺可促进这种可塑性变化,可能是主要的神经功能恢复的物质基础。3 MCAO大鼠梗死灶周围皮层GAP43mRNA及nestinmRNA缺血后升高幅度不大,GAP43mRNA对侧对应皮层表达增加。针刺可促进两者的表达,两者代表神经再生,可能参与了神经系统的可塑性变化过程。4 梗死灶周围皮层的可塑性变化可能与瘫痪肢体的恢复有关。 <WP=108>(二)临床部分 治疗前后肢体运动功能的改善很明显的,主要的治疗效果是改善了异常运动模式。针刺促通术是在现代神经康复基础上形成的新理论及技术,对临床工作有指导意义。四、本研究的主要创新点(一)基础部分
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