马尾松（Pinus massoniana Lamb.）是松科松属乔木,适应性强,速生丰产,兼具用材、产脂和松花粉利用等功能,纤维优良且全树综合利用价值高,是我国南方亚热带地区重要的造林先锋树种。马尾松遗传改良近40年,已建立了多个种子园,但马尾松种子园种子产量低,造成良种供应不足,极大地限制了马尾松林地生产力的提高。体细胞胚胎发生技术为实现马尾松良种快繁提供了一条有效的途径,但马尾松胚性细胞团诱导率低、胚状体成熟分化困难,限制着马尾松体细胞胚胎发育规模化效应的发挥。本研究以马尾松未成熟雌配子体为实验材料,LP为基本培养基,对马尾松胚性细胞团的诱导体系进行优化,探讨建立一套高效的马尾松体细胞胚胎发生体系,主要研究结果如下:1.胚性细胞团的发生及类型:大部分胚性培养物的发生是由雌配子体的珠孔处产生的,不同处理、不同家系下诱导产生的胚性细胞团状态不同,根据珠孔处的变化、颜色、质地,分为5类;（1）从珠孔处吐出丝状或团状物,呈白色半透明状;（2）珠孔开裂处呈白色颗粒状,质地晶莹半透明;（3）珠孔处培养物褐化;（4）珠孔处开裂,但开裂处较平滑,无白色颗粒状突起;（5）珠孔处无变化,但雌配子体膨大;前两种类型培养物组织具有极性结构,后三类培养物组织无极性结构。2.马尾松胚性细胞团诱导的最佳激素组合为1.0mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+1.0 mg·L-1NAA+1.Omg·L-1 KT,诱导率最高可达40.00%;琼脂培养基浓度过高或过低均不利于胚性细胞团的诱导,当浓度为8.5g·L-1时,胚性细胞团诱导率最高,可达40.00%;将马尾松未成熟胚置于23℃下培养,更有利于胚性细胞团的形成,诱导率最高,可达43.33%;不同母树基因型间胚性细胞团的诱导及其状态存在显著性差异,试验中还发现未成熟种子越饱满,胚性细胞团诱导率越高。3.胚性细胞团内外层结构的增殖倍数存在显著差异,胚性细胞团的外层增殖倍数大于内层,且具有较多的极性结构,因此,在将胚性细胞转入新鲜培养基时保持相同的位置是有必要的,因为方向的改变会对胚性细胞团的生长有影响。4.马尾松体细胞成熟分化对ABA的浓度较为敏感,当ABA浓度在10-20 mg·L-1范围时有利于马尾松体细胞胚的形成。5.对马尾松体细胞胚胎发育过程进行的组织学与细胞学观察表明:胚性细胞团组织由圆形的具有浓密细胞质的分生组织细胞和长条形的具有大液泡的胚性胚柄细胞组成,不同处理、不同基因型下诱导产生的胚性细胞团状态及结构不同;只有特定的结构的胚性细胞团才能进行长期增殖,成熟发育成体细胞胚;诱导阶段和增殖阶段主要处于原胚期（PEMs）,胚性细胞团组织经过PEMⅠ、PEMⅡ、PEMⅢ三个时期后,当极性结构的胚头呈现子弹头状时,进入早期体细胞胚阶段,胚性胚柄细胞逐渐退化,胚头发育饱满,之后胚头周围丛生的子叶胚伸长,发育为再生小植株。