CD4~+T淋巴细胞亚群Th9在儿童免疫性血小板减少症发病中的作用及机制

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目的探讨Th9淋巴细胞及细胞因子IL-9在儿童免疫性血小板减少症(ITP)中表达的改变及可能的作用机制。方法选取2013年3月-2014年1月郑州大学第一附属医院儿内科收治的初诊ITP患儿36例。同时以年龄、性别为匹配因素按群体匹配原则随机选取郑州大学第一附属医院健康体检儿童20例作为对照。以上ITP患儿诊断均符合2011年美国血液病协会(ASH)制定的诊断标准,且入院时无需紧急处理的严重出血情况。所有儿童均无其它自身免疫性、感染性、恶性血液/肿瘤性疾病,且一个月内未使用过肾上腺糖皮质激素、免疫球蛋白等免疫调节剂。试验在得到郑州大学第一附属医院伦理委员会许可,家属知情同意,并签署知情同意书的情况下进行。纳入的样本均采集晨起空腹肝素钠抗凝血2ml,800μl行流式细胞术测Th9细胞比例;200μl采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)测PU.1mRNA表达水平;余离心后取血浆-20°C保存备用,酶联免疫吸附法(ELISA)测IL-9水平。实验数据采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。数据正态性检验使用Shapiro-Wilk检验,方差齐性检验使用Levene检验。根据数据分布类型,计量资料用均数±标准差(X S)或中位数(四分位间距)描述,组间比较定量资料用t检验或Wilcoxon秩和检验,定性资料用卡方检验。PU.1mRNA、Th9和IL-9及PLT计数两两间的相关性检验,根据数据是否满足双变量正态和线性的条件,选择Pearson积矩相关或Spearman秩相关分析。检验水准取=0.05。结果1.ITP组PU.1mRNA表达水平(Ζ=1.864,P=0.062)、Th9细胞比例(t=1.824,P=0.074)均较健康对照组升高,差异无统计学意义;ITP组IL-9水平较健康对照组明显升高(t=3.014,P=0.004),差异有统计学意义。2.相关性分析:PU.1mRNA表达水平与Th9细胞比例正相关(rs=0.436,P=0.008),相关有统计学意义;PU.1mRNA表达水平与IL-9水平正相关(rs=0.254,P=0.135)、Th9细胞比例与IL-9水平正相关(r=0.034,P=0.84),相关无统计学意义。PU.1mRNA表达水平与PLT计数负相关(rs=-0.045,P=0.793)、Th9细胞比例与PLT计数负相关(rs=-0.048,P=0.780),相关无统计学意义;IL-9水平与PLT计数负相关(rs=-0.349,P=0.037),相关有统计学意义。结论细胞因子IL-9可能通过促进T、B淋巴细胞及肥大细胞等效应细胞的增殖、活化,参与儿童ITP的发病;但Th9细胞在其发病中的作用尚不明确。
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