Nucleolin在电离辐射诱导的p53变化中的调控作用

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Nucleolin(核仁素,又称c23)基因具有多种生物学功能,包括调控核糖体的生物合成与成熟,调控细胞增殖、生长、胚胎发生、胞质分裂、染色质复制与核仁的发生等过程。最近有研究报道Nucleolin可能参与对抑癌基因p53的调控。p53蛋白mRNA的5’端非翻译区(UTR)是Nucleolin和核糖体蛋白26(RPL26)的结合区域,在健康的细胞中Nucleolin优先结合在mRNA的5’端非翻译区,p53的合成受到抑制,当DNA损伤时RPL26就优先结合于5’端非翻译区,增加p53转录的几率。本实验采用分析细胞学及分子生物学手段,对电离辐射作用于人乳腺癌细胞MCF-7后Nucleolin蛋白的表达、分布的影响及其对p53的调控进行研究。胞浆、胞核及总蛋白的时程、量效实验表明,4 Gy X射线照射4 h后,Nucleolin和p53表达量增加,并发生了由胞核到胞浆的穿梭,24 h后又基本恢复照射前水平;通过p53沉默实验表明,Nucleolin在4 Gy X射线照射4 h后开始下降,直至48 h仍处于低表达水平;本实验也发现Nucleolin的穿梭并不完全依赖于Nucleolin-p53复合体形成,但还需要进一步实验来确定其其它出胞途径;同时Leptomycin B的作用对Nucleolin和p53总量没有影响,但可以增加电离辐射诱导的蛋白穿梭,其机制有待于进一步深入探究。蛋白滞后实验表明:Nucleolin和p53 N末端的结合活性在4 Gy照射4 h和8 h后结合活性最弱,同时电离辐射可以使Nucleolin和p53互相控制减弱。以上结果将为揭示电离辐射对p53信号传导通路的影响提供重要的细胞学基础,并为辐射细胞效应研究提供新的生物学依据。
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