【摘 要】
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目的:探讨草苁蓉多糖（Boschnikia rossica polysaccharides,BRPS）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。方法:LPS刺激小鼠J774A.1巨噬细胞,从而建立体外巨噬炎症模型。将小鼠J774A.1巨噬细胞随机分为正常组、模型组、BRPS组（BRPS浓度分别为25、50、100mg/L）,用细胞增
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目的:探讨草苁蓉多糖（Boschnikia rossica polysaccharides,BRPS）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。方法:LPS刺激小鼠J774A.1巨噬细胞,从而建立体外巨噬炎症模型。将小鼠J774A.1巨噬细胞随机分为正常组、模型组、BRPS组（BRPS浓度分别为25、50、100mg/L）,用细胞增殖毒性试剂盒（CCK-8）检测J774A.1巨噬细胞存活率,酶联免疫吸附法（enzyme-linked imnuinosorbent assay,ELISA）检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）水平。用免疫印迹法测定环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、Toll样受体4（Toll-like receptor,TLR4）、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor88,My D88）、白介素-1受体相关激酶4（interleukin-1 receptor-associated kinase4,IRAK4）、核转录因子-κB（nuclear factor-кB,NF-κB）、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路蛋白以及IL-1β表达情况。结果:1.LPS在100～2000ng/mL浓度范围时对小鼠J774A.1巨噬细胞存活率无影响（P>0.05）;但能够明显上调J774A.1细胞炎症因子TNF-α和IL-6的分泌,提示J774A.1细胞的炎症模型构建成功。2.BRPS在0～100mg/L浓度范围内对J774A.1细胞存活率无显著影响（P>0.05）。3.与正常组相比,J774A.1细胞炎症模型中TNF-α、IL-6以及IL-1β分泌显著增加（P<0.05）;与模型组相比,BRPS组小鼠J774A.1细胞炎症模型中TNF-α、IL-6以及IL-1β分泌降低（P<0.05）。4.与正常组比较,模型组小鼠J774A.1巨噬细胞COX-2、TLR4、My D88、IRAK4、p-NF-кB、NF-кB、p-ERK、p-JNK、p-p38蛋白水平显著增加（P<0.05）;与模型组相比,COX-2、TLR4、My D88、IRAK4、p-NF-кB、NF-кB、p-ERK、p-JNK、p-p38蛋白水平明显降低（P<0.05）。5.与模型组相比,BRPS组、BAY11-7082组及BAY11-7082+BRPS组中,p-NF-кB、NF-кB活化水平以及IL-1β蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;与BAY11-7082组相比,BAY11-7082+BRPS组的p-NF-кB、NF-кB活化水平降低（P<0.05）。与模型组相比,BRPS组、U0126组及U0126+BRPS组中,p-ERK活化水平以及IL-1β蛋白表达水平著降低（P<0.05）;与U0126组相比,U0126+BRPS组的p-ERK活化水平降低（P<0.05）。与模型组相比,BRPS组、SP600125组及SP600125+BRPS组中,p-JNK活化水平以及IL-1β蛋白表达水平著降低（P<0.05）;与SP600125组相比,SP600125+BRPS组的p-JNK活化水平降低（P<0.05）。与模型组相比,BRPS组、SB203580组及SB203580+BRPS组中,p-p38活化水平以及IL-1β蛋白表达水平著降低（P<0.05）;与SB203580组相比,SB203580+BRPS组的p-p38活化水平降低（P<0.05）。结论:BRPS对LPS诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应起到抑制作用,其抗炎作用可能与其抑制TLR4/NF-κB及MAPK信号通路有关。
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