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目的吗啡作为经典的阿片类镇痛药物,通过模拟内源性抗痛物质脑啡肽的作用,激动中枢神经阿片受体而产生强大的镇痛作用。研究发现远端鞘内吗啡后处理可通过激活中枢的阿片受体对在体大鼠的心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,但是关于鞘内注射吗啡激活中枢阿片受体后通过怎样的机制介导的心肌保护效应还未完全阐明;PI3K/n NOS/c GMP信号通路是吗啡在初级感觉神经元中抑制伤害刺激的重要信号通路之一,本研究旨在探讨PI3K/n NOS/c GMP信号通路在远段鞘内吗啡后处理中减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠,体重280~320 g,成功建立鞘内置管和缺血再灌注损伤的模型。实验分组:本实验共分为两个部分。第一部分,探讨PI3K/n NOS/c GMP信号通路在远端鞘内吗啡后处理心肌保护中的作用,采用随机数字表法分为13组,每组6只:假手术组(SHAM)、生理盐对照水组(CON组)、远端鞘内吗啡后处理组(RMPC组)、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路阻断剂渥曼青霉素(Wortmannin)+RMPC组(W+RMPC)、非选择性NO合成酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)+RMPC组(L-NAME+RMPC)、神经性NO合成酶抑制剂7-Nitroindazole(7-NI)+RMPC组(7-NI+RMPC)、可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanlylyl cyclase,s GC)抑制剂1H-[1,2,4]Oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one(ODQ)+RMPC组(ODQ+RMPC)、蛋白激酶G(Protein kinases G,PKG)抑制剂(KT5823)+RMPC组(KT5823+RMPC)、另设阻断剂自身对照组W组、L-NAME组、7-NI组、ODQ组、KT5823组。第二部分,观察远端鞘内吗啡后处理对胸段脊髓内c GMP含量的影响,另外再观察鞘内注射PI3K/n NOS/c GMP信号通路阻断剂后脊髓c GMP含量的变化,采用随机数字表法分为9组,每组4只,远端鞘内吗啡后处理后0 min组、30 min组、60 min组、90 min组、120 min组、W+RMPC组、L-NAME+RMPC组、7-NI+RMPC组、ODQ+RMPC组。观察指标包括:血流动力学计算、梗死区(IS)体积及IS与缺血危险区(AAR)体积的比值(IS/AAR)、酶联免疫检测c GMP的光密度值(OD)。统计学处理:所有计量资料均以均数±标准差(x±s)表示,各组之间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Newman-Keuls分析,P<0.05认为差异有统计学意义结果血流动力学:各组内缺血25 min、缺血30 min、再灌注120 min三个时间点的MAP、HR和RPP较基础值都有降低(P<0.05 vs Baseline);与CON组比较RMPC组再灌注120 min时MAP增高(P﹤0.05 vs CON)。梗死面积:与CON组相比,RMPC组的IS和IS/AAR均明显减少(P﹤0.05 vs CON);与RMPC组比较,W+RMPC组、L-NAME+RMPC组、7-NI+RMPC组、ODQ+RMPC组、KT5823+RMPC组的IS和IS/AAR均明显增加(P﹤0.05 vs RMPC);c GMP含量:吗啡注射后30 min脊髓组织中c GMP的含量达到了45.3±8.36 pmol/g(P﹤0.05 vs 0 min),60 min为24.7±2.31 pmol/g(P﹤0.05 vs 0 min),90 min后c GMP的含量才恢复至基础水平(P>0.05 vs 0 min),对比与RMPC组,加入信号通路的阻断剂的各组30 min时胸段脊髓的标本中c GMP都没有增加(P<0.05vs RMPC)。结论PI3K/n NOS/c GMP信号通路参与介导远端鞘内吗啡后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用;并且RMPC的保护效应可能与吗啡注射30 min后的第二信使c GMP含量增加有关。