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本文结合亲硫层析和混合模式吸附,制备新型的亲硫性混合模式吸附剂,并用于抗体分离。亲硫层析是分离纯化抗体的有效方法,配基中砜基和硫醚产生协同作用,高盐浓度下对抗体产生特异性作用,达到高效分离抗体的目的。结合混合模式吸附,在配基中引入含氮杂环,能够促进抗体的吸附,提高吸附容量,同时具有一定的耐盐特性,实现从中等离子强度的料液中直接吸附抗体。本文在课题组前期工作的基础上,利用自制的大孔型纤维素/碳化钨复合微球作为吸附剂基质,制备多种亲硫性混合模式吸附剂,考察模型蛋白的吸附规律,探讨相关吸附机理,并用于从卵黄稀释液中分离卵黄抗体。以大孔型纤维素/碳化钨复合微球作为基质,二乙烯基砜和烯丙基溴为活化剂,以2-巯基甲基咪唑、2-巯基苯并咪唑和4-巯基-乙基吡啶为配基,制备了系列亲硫性混合模式剂,Cell-WC-DVS-MEP、Cell-WC-DVS-MMIM、Cell-WC-DVS-MBIM和Cell-WC-AB-MEP。通过优化活化过程和耦联反应,得到二乙烯基砜活化的配基密度为60μmol/ml基质,烯丙基溴活化的配基密度为90μmol/ml基质。以鸡卵黄抗体(IgY)为模型蛋白,考察了缓冲液pH、盐浓度对IgY吸附平衡的影响。结果表明,新型吸附剂对IgY的吸附性能良好,且具有一定的耐盐特性。pH是影响IgY吸附的主要因素,pH5时吸附容量最大,pH＜4可以用于IgY的解吸。添加硫酸铵可以促进IgY的吸附。耦联不同配基的吸附剂表现出不同的吸附能力,Cell-WC-DVS-MMIM对IgY的吸附容量大,且选择性高,适合于IgY的分离纯化。以Cell-WC-DVS-MMIM为吸附剂,进行了卵黄抗体的层析分离研究。Cell-WC-DVS-MMIM可以从卵黄稀释中直接分离得到IgY,但IgY的纯度很低。将卵黄稀释液等点沉淀,离心取上清液,盐析沉淀,重新溶解后上柱分离,可得到纯度高达98%的IgY洗脱液。提高上样浓度和流速,IgY分离纯度可以保持。结果表明,Cell-WC-DVS-MMIM具有良好的应用前景,为进一步扩张床吸附分离卵黄抗体的工艺开发提供了依据。