人瘢痕组织Wnt/β-Catenin信号通路活性与β-Catenin亚细胞分布的研究

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目的初步探讨Wnt/β-Catenin信号通路在人瘢痕形成中的作用及其调控机制。方法1、选取青岛大学附属医院骨科再次手术患者21例(男15例,女6例),取手术切除的皮下瘢痕组织及临近的正常组织。2、从组织标本中提取m RNA,应用Real time Quantitative PCR技术检测受Wnt/β-Catenin信号通路调节的基因Axin-2、Dkk-1、c-Myc的表达,以了解并比较瘢痕组织与周围正常皮下组织中Wnt/β-Catenin信号通路的活性。3、应用免疫荧光标记方法检测组织成纤维细胞中β-Catenin的分布。结果1、在瘢痕组织中Collagen-1的m RNA表达水平显著上调,两者之间差异有统计学意义(P<0.005)。在同一个体中瘢痕组织与周围正常组织相比,前者中Axin-2、Dkk-1及c-Myc的m RNA表达水平无显著上调,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。2、瘢痕组织成纤维细胞中β-Catenin的分布与周围正常组织成纤维细胞存在差异,在周围的正常组织成纤维细胞中β-Catenin在胞浆中呈弥漫散布,而在瘢痕组织胞浆中的β-Catenin呈团块样聚集在胞核周围。织中β-Catenin在胞浆呈弥漫性散布,而在瘢痕组织中β-Catenin在胞浆呈团块样聚集。而瘢痕组织中Wnt/β-Catenin的活性与周围正常组织无显著区别。在对模式生物的研究中发现瘢痕形成过程中Wnt/β-Catenin通路活性增强,而本研究在对人瘢痕组织的研究中未发现这一现象,其可能有以下两种解释:其一,不同于模式生物,Wnt/β-Catenin信号通路在人瘢痕形成过程中没有明显的活性改变;其二,由于取材的限制,我们所取的瘢痕组织为术后8周以上的成熟瘢痕组织。在瘢痕形成到成熟的过程中,可能存在Wnt/β-Catenin信号通路由激活到抑制的调节过程,β-Catenin亚细胞定位的改变可能参与该调控过程。
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