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目的探讨肿瘤抑制基因HRPT2突变与颌骨骨化纤维瘤(ossifying fibroma,OF)的关系,分析其在颌骨骨化纤维瘤形成中的作用。方法收集北京大学口腔医院住院患者手术切除后的病变组织及相应外周血(签署知情同意书)。1整理分析这些病例临床表现特征等,以便促进对该肿瘤的了解。2提取新鲜病变组织及相应的外周血总DNA,该基因的17个外显子及剪切位点被设计为15个片段,通过PCR技术扩增,并对PCR产物利用直接测序的方法检测HRPT2基因突变情况。3通过免疫组织化学的方法检测HRPT2基因编码蛋白parafibromin表达情况。结果1共收集到40例散发性OF和1例多发性OF伴发甲状旁腺功能亢进-颌骨肿瘤综合征(Hyperparathyroidism-jaw tumor syndrome,HPT-JT syndrome)的病例。2临床特征结果:病人首次就诊年龄分布在1-47岁之间,中位年龄19.5岁,男女比率为19:21。发生在上颌者44.7%(17/38),发生在下颌者55.3%(21/38)。其中有两例为同时累及上颌骨和下颌骨的多发病例。90%的患者主要症状为颌面骨膨隆(36/40),其他一些临床表现包括疼痛10%(4/40),咬合痛2.5%(1/40),鼻塞5%(2/40),麻木感7.5%(3/40),感觉不适5%(2/40),牙松动2.5%(1/40),耳鸣2.5%(1/40),表面溃破2.5%(1/40)。40例病人中有38例可获得影像学资料,透射影者21%(8例),混合密度影者66%(25例),阻射影者13%(5例)。其中界限清楚者29例,界限模糊者9例。3 HRPT2基因突变情况:在2例(病例#1和病例#2)散发性OF中发现了2个均发生exon1处的体细胞水平的突变,病例#1是在13-16位碱基处缺失了4个碱基CTTA(c.13-16del CTTA);病例#2是在8-10位碱基处缺失了3个碱基ACG同时又插入了2个碱基CT(c.8-10del ACGins CT)。该两处移码突变均导致了编码蛋白的提前截断。病例#1是在第5位氨基酸残基处发生突变,由原来的亮氨酸改变为丙氨酸(p.Leu5Alafs*15),并在第15位密码子处终止;病例#2是在第3位氨基酸残基处发生突变,由原来的天冬氨酸突变为丙氨酸(p.Asp3Alafs*18),并在新形成的阅读框中的第18位密码子处终止。对HPT-JT综合征患者和其父亲的血液样本进行HRPT2基因检测后,发现一个新的HRPT2基因的胚系突变(c.18ins GTTAG)和一个多态性位点,-10T>G(rs188082584)。该突变是在18位碱基处插入了5个碱基GTTAG,导致了在第6位氨基酸处发生突变,由原来的丝氨酸突变成为精氨酸(p.Ser6Argfs*17),并在第17位密码子处终止。4免疫组织化学结果:所有的OF患者(包括携带突变者),免疫组化染色显示在病损梭形细胞的细胞核有时在细胞质中parafibromin均有表达。结论1本研究在5%(2/40)的散发性OF中发现HRPT2基因的突变。说明HRPT2基因突变仅发生于少数散发性OF中,不是散发性OF的优势致病基因。2虽然仅有1例HPT-JT患者,HRPT2基因的突变再次证实HRPT2基因突变是HPTJT的优势致病基因。