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目的:肝纤维化是一种慢性肝损伤时常见的创伤修复反应,可由多种病因引起包括酒精或药物毒性、持续性病毒感染、遗传因素等。其核心环节是肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化,表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),并分泌包括Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ,COL1)等多种成分在内的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)。Notch和Wnt信号通路普遍分布于生物体内,精准调控着细胞各项生理进程,如生长、分化、凋亡等。研究显示这两条通路可能与肝纤维化的形成关系密切,本实验通过构建肝纤维化模型,检测模型中Notch和Wnt信号通路关键因子mRNA的表达来探讨上述通路对肝纤维化的影响。方法:1.构建模型:选取健康雄性Sprague Dawley大鼠20只,在实验前禁饮食,随机分为正常对照组(n=10)和肝纤维化模型组(n=10)。每3天1次,于模型组大鼠皮下注入40%四氯化碳(0.6 mL/100 g体重,首剂加倍),正常对照组则以相同方式注入等量0.9%NaCl,持续至第8周末,处死所有大鼠,取肝脏组织立即置于低温环境冷藏。2.检测指标:提取两组肝脏标本RNA,经逆转录反应合成cDNA,采用Q-PCR方法检测正常对照组及肝纤维化模型组α-SMA、COL1α2、Notch3、Wnt5a、β-catenin及GAPDH mRNA表达量。3.统计分析:比较Notch与Wnt信号分子在两组间表达的差异性,分析肝纤维化指标与Notch、Wnt信号通路分子相关性。应用SPSS22.0软件分析所有实验数据,其中计量资料的结果用均数±标准差(`x±S)表示,组间均数之间的比较使用两独立样本t检验,相关性分析使用Persion相关分析法。以P<0.05为差异有统计学意义。结果:大鼠肝脏组织中肝纤维化指标及Notch、Wnt信号分子mRNA表达变化情况:Q-PCR检测结果显示,与正常对照组相比,α-SMA、COL1α2、Notch3、Wnt5a表达增高,差异有统计学意义(P<0.05),β-catenin表达无明显差异(P>0.05)。各项指标中,α-SMA与Wnt5a呈正相关(r=0.689,P<0.05),COL1α2与Notch3呈正相关(r=0.676,P<0.05)。结论:Notch及Wnt非经典信号通路参与了肝纤维化的发生、发展过程。选择性干预Notch3、Wnt5a转导可能成为抗肝纤维化新途径。